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如何降低腫瘤細(xì)胞分離中的污染

時間:2017-9-29閱讀:195
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在分離單核腫瘤細(xì)胞時,我們就必須采取措施來降低血小板污染。

在制備單核細(xì)胞懸液時,Stemcell給出了如下的建議:

1. 從Ficoll密度梯度離心中取出單核細(xì)胞層時,避免吸到富含血小板的血漿。

2. 緩慢離心,洗滌單核細(xì)胞(120×g,10分鐘,常溫)。

3. 小心棄上清,其中含有血小板,用新鮮的緩沖液重懸細(xì)胞(記得換個干凈的吸頭)。

4. 重復(fù)上面2步,總共洗滌3次。

另外,Stemcell還給出了一些降低血小板污染的其他建議:

• 使用大口徑的針來抽取血液樣本

• 輕輕地抽血,如果使用注射器推桿,不要大力牽引

• 抽血時使用更多的抗凝血劑,比如,增加肝素、EDTA或ACD的量

• 使用不含鈣鎂的緩沖液進(jìn)行洗滌和細(xì)胞分離

• 在細(xì)胞分離緩沖液中使用更高水平的EDTA(2或3 mM)

• 確保輕柔操作,不要震蕩

Stemcell公司的產(chǎn)品包括:檢測造血干細(xì)胞功能的半固體培養(yǎng)基MethoCult®和 MyeloCult®系列,培養(yǎng)和鑒定間充質(zhì)干細(xì)胞的MesenCult®系列,培養(yǎng)和分析神經(jīng)干細(xì)胞的NeuroCult®系列,培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞和多能干細(xì)胞的Es-Cult®系列產(chǎn)品,可以分選各種腫瘤細(xì)胞的免疫磁性分選系統(tǒng)EasySep®,全自動細(xì)胞分選儀RoboSep®,全自動克隆挑選系統(tǒng) EasyPick®,及與其配套使用的ClonaCell®-HY試劑等等。

血小板是三大血細(xì)胞之一,在培養(yǎng)過程中由于黏性很大,還有容易污染,在培養(yǎng)中是一類不好對付的細(xì)胞。Stemcell認(rèn)為,在制備血小板細(xì)胞懸液時,要使用大口徑的針抽取樣品,動作輕柔。
進(jìn)口、國產(chǎn)    英文名稱:    L-羥脯氨酸    L-Hydroxyproline    含量:    BR,99%
進(jìn)口、國產(chǎn)    英文名稱:    L-α-氨基-β-羥基丁酸    L-Threonine    含量:    BR,99%
進(jìn)口、國產(chǎn)    英文名稱:    D-α-氨基-β-羥基丁酸    D-Theronine    含量:    BR,99%
進(jìn)口、國產(chǎn)    英文名稱:    DL-α-氨基-β-羥基丁酸    DL-Theronine    含量:    BR,99%
進(jìn)口、國產(chǎn)    英文名稱:    N-叔丁氧羰基-L-蘇氨酸    BOC-L-Threonine    含量:    BR,99%
進(jìn)口、國產(chǎn)    英文名稱:    N-芐氧羰基-L-蘇氨酸    CBZ-L-Threonine    含量:    BR,99%
進(jìn)口、國產(chǎn)    英文名稱:    L-胰化蛋白氨基酸    L-Tryptophan    含量:    BR,99%
進(jìn)口、國產(chǎn)    英文名稱:    D-胰化蛋白氨基酸    D-Trytophan    含量:    BR,99%
進(jìn)口、國產(chǎn)    英文名稱:    DL-胰化蛋白氨基酸    DL-Trytophan    含量:    BR,99%
進(jìn)口、國產(chǎn)    英文名稱:    N-叔丁氧羰基-L-色氨酸    BOC-L-Tryptophan    含量:    BR,99%
腫瘤細(xì)胞

 

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