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羧肽酶A3(CPA3)重組蛋白

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更新時(shí)間:2023-03-21 20:47:45瀏覽次數(shù):273次

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Carboxypeptidase A3 (CPA3)
物種 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生
羧肽酶A3(CPA3)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移mei1(gGT1)重組蛋白英文名稱:Recombina Gamma-Glutamyltransferase 1 (gGT1)腺苷suan環(huán)化mei5(ADCY5)重組蛋白英文名稱:Recombina Adenylate Cyclase 5 (ADCY5)葡萄糖苷suanmeiβ(GUSb)重組蛋白英文名稱:Recombina Glucuro

商品介紹:

MC-CPA; Mast cell carboxypeptidase A; Carboxypeptidase A3, Mast Cell

酶與激酶

感染免疫

風(fēng)濕病學(xué)

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::分泌

預(yù)測分子量:66.0kDa

實(shí)際分子量:66kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Ile110~Ser417 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):8.9

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

物種

羧肽酶A3(CPA3)重組蛋白

Recombinant Carboxypeptidase A3 (CPA3)

Homo sapiens (Human,人)

蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png


相關(guān)產(chǎn)品:

Recombinant Human NSE宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human COLEC11宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human WFS1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human ATP5ME宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human   
操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

VWF產(chǎn)品名稱: 假性友因子/性友因子抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit

NSF產(chǎn)品名稱: N-乙基順丁烯二酰亞胺敏感融合蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Zebrafish, Sheep

RAG1AP1產(chǎn)品名稱: RAG1激活蛋白1抗體交叉反應(yīng): Mouse, Rat

MAP3K14/NFkB Inducing Kinase產(chǎn)品名稱: NFkB誘導(dǎo)激mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit

HMGB1產(chǎn)品名稱: 高遷移率族蛋白B1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow

KLHDC10產(chǎn)品名稱: KLHDC10蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Rabbit, Sheep

FGF21產(chǎn)品名稱: 成纖維細(xì)胞生長因子21抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow

HO-2產(chǎn)品名稱: 紅su氧合mei2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

CD45產(chǎn)品名稱: 白細(xì)胞共同抗原抗體交叉反應(yīng): Human

NRAP產(chǎn)品名稱: 伴肌動(dòng)蛋白相關(guān)錨定蛋白抗體交叉反應(yīng): Human   

羧肽酶A3(CPA3)重組蛋白Tau-231蛋白(TAU-231)ELISA試劑盒TAU-231Tau-231蛋白ELISA試劑盒Human TAU-231 ELISA Kit

Tau-181蛋白(TAU-181)ELISA試劑盒TAU-181Tau-181蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human TAU-181 ELISA Kit

s腺苷同型半胱氨suan(SAH)ELISA試劑盒SAHs腺苷同型半胱氨suanelisa檢測試劑盒Human S-adenosylhomocysteine,SAH ELISA kit

Syndecan-3/(SDC3)ELISA試劑盒SDC3Syndecan-3/elisa kitHuman SDC3 ELISA Kit

STEAP家族成員4(Steap4)ELISA試劑盒Steap4STEAP家族成員4ELISA試劑盒Human Steap4 ELISA Kit  
注意事項(xiàng):

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí)。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),有時(shí)需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時(shí)請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作 

 


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