公司產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床！

商品介紹：

蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

相關(guān)產(chǎn)品：

Recombinant Human PMM2宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human EYA1宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human ACTR10宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human SHC宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human   

注意事項：

1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復(fù)，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作                                            

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

CD99L2產(chǎn)品名稱: CD99樣蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human

DC-SIGN產(chǎn)品名稱: 細胞間粘附分子非整合su蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

human CD4/APC產(chǎn)品名稱: APC標記小鼠抗人CD4單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian

RAB8A產(chǎn)品名稱: ras基因家族Rab8蛋白/原基因c MEL抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Sheep

RENT1+hUPF1產(chǎn)品名稱: ATP依賴解旋meiRENT1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse

RPS9產(chǎn)品名稱: 40S核糖體蛋白S9抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Zebrafish, GuineaPig, Cat

phospho-GluR1 (Ser645)產(chǎn)品名稱: 谷氨suan受體1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

INDOL1產(chǎn)品名稱: 吲哚1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

AKT1產(chǎn)品名稱: 蛋白激meiB抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep

Phospho-IRAK1 (Thr387)產(chǎn)品名稱: 白介su-1受體相關(guān)激mei1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit   

核糖核酸酶A(RNase A)重組蛋白人糖類抗原72-4(CA72-4)ELISA試劑盒CA72-4糖類抗原72-4elisa檢測試劑盒Human carbonhydrate antigen 72-4,CA72-4 ELISA kit

人糖類抗原50(CA50)ELISA試劑盒CA50糖類抗原50elisa kitHuman carbohydrate antigen 50,CA50 ELISA Kit

人糖類抗原19-9(CA19-9)ELISA試劑盒CA19-9糖類抗原19-9ELISA試劑盒Human carbonhydrate antigen 19-9,CA19-9 ELISA kit

人糖基化依賴的細胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒GlyCAM-1糖基化依賴的細胞黏附分子elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human glycosylation-dependent cell adhesion molecule-1,GlyCAM-1 ELISA Kit

人糖化蛋白(GSP)ELISA試劑盒GSP糖化蛋白elisa kitHuman glycosylated serum protein，GSP ELISA Kit