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耐酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)重組蛋白

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-21 18:54:26瀏覽次數(shù):271次

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Acid Phosphatase 5, Tartrate Resistant
種屬 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生
耐酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:NADH脫氫mei5(ND5)重組蛋白英文名稱:Recombina NADH Dehydrogenase 5 (ND5)核糖核suanmeiA12(RNASE12)重組蛋白英文名稱:Recombina Ribonuclease A12 (RNASE12)血管緊張su轉(zhuǎn)化mei(ACE)重組蛋白英文名稱:Recombina Angiotensin I

蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

物種

耐酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)重組蛋白

Recombinant Acid Phosphatase 5, Tartrate Resistant (ACP5)

Homo sapiens (Human,人)

商品介紹:

TRAP; TrATPase; Tartrate Resistant Acid Phosphatase; Type 5 acid phosphatase

酶與激酶

代謝通路

肝膽病學(xué)

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::溶酶體

預(yù)測分子量:57.4kDa

實(shí)際分子量:57kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Gln79~Arg318 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):7.4

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

圖片5.png

圖片1.png



相關(guān)產(chǎn)品:

Recombinant Human SOX2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human INTS8宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human SRM宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human GBP1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human   

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

注意事項(xiàng):

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí)。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),有時(shí)需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時(shí)請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作 
COMMD3產(chǎn)品名稱: 銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow

TRF1產(chǎn)品名稱: 端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

IL-4R產(chǎn)品名稱: 白細(xì)胞介su4受體抗體交叉反應(yīng): Human

CR2產(chǎn)品名稱: 2型補(bǔ)體受體(CD21)抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

C1s產(chǎn)品名稱: 補(bǔ)體C1S鏈多肽抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse

MGLUR5產(chǎn)品名稱: 代謝型谷氨suan受體5B抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Horse, Sheep, Monkey

PCDHB12產(chǎn)品名稱: 原鈣粘蛋白β12抗體交叉反應(yīng): Human

caspase-3 p17 subunit產(chǎn)品名稱: 活化半胱胺suan蛋白mei蛋白-3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse

Prostatic Acid Phosphatase產(chǎn)品名稱: 前列suan性磷suanmei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Horse

phospho-AKT3 (Ser472)產(chǎn)品名稱: 蛋白激meiAKT3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep   

耐酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)重組蛋白人可溶性核因子κB受體活化因子(sRANK)ELISA試劑盒sRANK可溶性核因子κB受體活化因子elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Soluble Receptor Activator of Nuclear Factor-kB,sRANK ELISA Kit

人可溶性凋亡相關(guān)因子配體(sFASL)ELISA試劑盒sFASL可溶性凋亡相關(guān)因子配體elisa檢測試劑盒Human soluble Factor-related Apoptosis ligand,sFASL/Apo-1 ELISA Kit

人可溶性前體蛋白α(sAPPα)ELISA試劑盒sAPPα可溶性前體蛋白αelisa kitHuman soluble amyloid precursor protein α,sAPPα ELISA kit

人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)ELISA試劑盒sp185/HER-2可溶性蛋白185ELISA試劑盒Human soluble protein 185,sp185/HER-2 ELISA Kit

人可溶性彈性蛋白片段(sELAF)ELISA試劑盒sELAF可溶性彈性蛋白片段elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Soluble Elastin Fragments,sELAF ELISA Kit  


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