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丙酮酸脫氫酶α(PDHA1)重組蛋白

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-21 18:47:51瀏覽次數(shù):500次

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Pyruvate dehydrogenase alpha 1 (PDHA1)
種屬 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生
丙酮酸脫氫酶α(PDHA1)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:Janus激mei1(JAK1)重組蛋白英文名稱:Recombina Janus Kinase 1 (JAK1)AMP激活蛋白激meiγ1(PRKAg1)重組蛋白英文名稱:Recombina Protein Kinase, AMP Activated Gamma 1 (PRKAg1)AMP激活蛋白激meiγ2(PRKAg2)重組蛋白英文名稱:Reco

公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

物種

丙酮酸脫氫酶α(PDHA1)重組蛋白

Recombinant Pyruvate dehydrogenase alpha 1 (PDHA1)

Homo sapiens (Human,人)

商品介紹:

PDHCE1A; PHE1A; PHE1-A; PDHa; PDH-A; Pyruvate Dehydrogenase(lipoamide)Alpha 1; Pyruvate Dehydrogenase E1 Component Subunit Alpha,Aomatic Form,Mitochondrial; Pyruvate Dehydrogenase Alpha

酶與激酶

代謝通路

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::線粒體

預(yù)測分子量:41.5kDa

實(shí)際分子量:46kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Phe30~Ser390 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):6.5

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png



相關(guān)產(chǎn)品:

Recombinant Human PRKCSH宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human PAK4宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human PLEKHG3宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human SOX17宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human   

注意事項(xiàng):

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí)。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),有時(shí)需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時(shí)請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作                                            

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Cdc25C產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow

Phospho-eS (Thr495)產(chǎn)品名稱: 合成mei3(內(nèi)皮型)抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep, GuineaPig

GOLGA8B產(chǎn)品名稱: 高爾基體自身蛋白8B抗體交叉反應(yīng): Human

Histone H2B (Acetyl K120)產(chǎn)品名稱: 乙?;M蛋白H2B (Lys120)鼠單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

KCNA7產(chǎn)品名稱: 鉀電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員7抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Rabbit

Folate Receptor 4產(chǎn)品名稱: 葉suan受體4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

phospho-IKK gamma (Ser31)產(chǎn)品名稱: KB蛋白激meiγ抗體交叉反應(yīng): Human

CCDC30產(chǎn)品名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白30抗體交叉反應(yīng): Human

CCR6產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞表面趨化因子受體6(CD196)抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

LRIG2產(chǎn)品名稱: LRIG2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig   

丙酮酸脫氫酶α(PDHA1)重組蛋白人氯離子胞內(nèi)通道蛋白4(CLIC4)ELISA試劑盒CLIC4氯離子胞內(nèi)通道蛋白4elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human CLIC4 ELISA Kit

人綠膿桿菌外毒suA(PEA)ELISA試劑盒PEA綠膿桿菌外毒suAelisa檢測試劑盒Human Pseudomonas Exotoxin A,PEA ELISA Kit

人落葉型天皰瘡抗體(PF)ELISA試劑盒PF落葉型天皰瘡抗體elisa kitHuman Pemphigus Foliaceus,PF ELISA Kit

人螺旋肽(THP)ELISA試劑盒THP螺旋肽ELISA試劑盒Human triple-helical peptide,THP ELISA Kit

人輪狀病毒抗原(RV Ag)ELISA試劑盒RV Ag輪狀病毒抗原elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Rotavirus antigen,RV Ag ELISA Kit 


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