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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
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堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)重組蛋白

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-21 18:48:53瀏覽次數(shù):276次

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase)
種屬 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生
堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)重組蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:鞭蟲(chóng)通用PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格鞭蟲(chóng)通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒Trichuris spp.變形桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒Proteus spp.PCR變形桿菌屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒Proteus spp.變形絲囊霉菌PCR檢測(cè)試劑盒Aphanomyces astaciPCR

圖片6.png



公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱:堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)重組蛋白   

物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase)

ENPP7; E-NPP 7; NPP-7; Ectonucleotide Pyrophosphatase/Phosphodiesterase 7; Sphingomyelin Phosphodiesterase; Intestinal alkaline sphingomyelinase

酶與激酶

神經(jīng)科學(xué)

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::n/a

預(yù)測(cè)分子量:26.5kDa

實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽:His234~Ala458 (Accession # Q6UWV6) with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):-

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human IL-1b宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human MYH9宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Goat leptin宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Goat

Recombinant Human LAT宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來(lái)分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試,條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測(cè)和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來(lái)制備可溶蛋白。

h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)

  誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒(méi)太大的問(wèn)題。

操作步驟

根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

1、樣品前處理:

a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管,然后再裂解。

c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

2、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作

特點(diǎn):

標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法。

酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時(shí)可見(jiàn)、敏感性高。

熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

phospho-TFRC (Ser24)產(chǎn)品名稱: 轉(zhuǎn)受體(CD71)抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse

SGCE產(chǎn)品名稱: SGCE蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

CYP3A4產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞色suP450 3A4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, GuineaPig

應(yīng)用類型: Other英文名稱: S100P英文別名: MIG9; Migration inducing gene 9; Protein S100-E; Protein S100-P; Protein S100P; S100 calcium binding protein P; S100 calcium-binding protein P; S100 P; S100E; S100P; S100P_HUMAN.

TLR1產(chǎn)品名稱: Toll樣受體1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse

應(yīng)用類型: Phosphorylated英文名稱: beta-Actin (Loading Control)AbBy Fluor®英文別名: Beta Actin; beta-Actin; ACTB; Actin cytoplasmic 1; Actin, beta; Beta actin; beta cytoskeletal actin; A X actin like protein; ACTB; Actin cytoplasmic 1; alpha sarcomeric Actin; Actx; Beta cytoskeletal actin; Melama X actin; PS1TP5BP1; ACTB_HUMAN.

ZAP70產(chǎn)品名稱: zeta相關(guān)蛋白70抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig

應(yīng)用類型: Other英文名稱: c-Kit英文別名: C Kit; CD 117; CD117; CD117 antigen; KIT; KIT_HUMAN; Mast/stem cell growth factor receptor; Mast/stem cell growth factor receptor Kit; p145 c-kit; PBT; Piebald trait protein; Proto oncogene c Kit; Proto oncogene tyrosine protein kinase Kit; Proto-oncogene c-Kit; SCF Receptor; SCFR; soluble KIT variant 1; Stem cell factor receptor; tyrosine protein kinase Kit; Tyrosine-protein kinase Kit; v kit Hardy Zuckerman 4 feline sarcoma viral oncogene homolog; v kit Hardy Zuckerman 4 feline sarcoma viral oncogene like protein; v-kit Hardy-Zuckerman 4 feline sarcoma viral oncogene homolog.

JAZF1產(chǎn)品名稱: JAZF1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Horse, Rabbit, Sheep

Cytokeratin 4產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞角蛋白4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit
堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)重組蛋白人磷酯酰肌醇特異性磷酯meiC(PIPLC)ELISA試劑盒PIPLC磷酯酰肌醇特異性磷酯meiCelisa kitHuman phosphoinositide-specific phospholipase C,PIPLC ELISA Kit

人磷脂轉(zhuǎn)移蛋白β(PITPNB)ELISA試劑盒PITPNB磷脂轉(zhuǎn)移蛋白βELISA試劑盒Human Phosphatidylinositol transfer protein beta isoform,PITPNB ELISA kit

人磷脂酰乙醇(PEth)ELISA試劑盒PEth磷脂酰乙醇elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human phosphatidyl ethanol,PEth ELISA kit

人磷脂酰肌醇抗體IgG(PI IgG)ELISA試劑盒PI IgG磷脂酰肌醇抗體IgGelisa檢測(cè)試劑盒Human phosphatidylinositol antibody IgG ELISA Kit

人磷脂酰肌醇抗體(IgM)ELISA試劑盒IgM磷脂酰肌醇抗體elisa kitHuman phosphatidylinositol antibody IgM ELISA Kit


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