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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
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多巴色素異構(gòu)酶(DCT)重組蛋白

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-21 19:04:40瀏覽次數(shù):266次

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Dopachrome Tautomerase (DCT)
種屬 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生
多巴色素異構(gòu)酶(DCT)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:N-乙酰半乳糖胺meiα(NAGa)重組蛋白英文名稱:Recombina N-Acetylgalactosaminidase Alpha (NAGa)N-乙酰半乳糖胺meiα(NAGa)重組蛋白英文名稱:Recombina N-Acetylgalactosaminidase Alpha (NAGa)NAD激mei(NADK)重組蛋白英文名稱:Recomb

商品介紹:

TYRP2; TRP-2; DT; Dopachrome Delta-Isomerase; Tyrosine-Related Protein 2; L-dopachrome Delta-isomerase

酶與激酶

腫瘤免疫

激素代謝

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜

預(yù)測(cè)分子量:30.8kDa

實(shí)際分子量:31kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽:Val28~Gly263 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):8.5

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

物種

多巴色素異構(gòu)酶(DCT)重組蛋白

Recombinant Dopachrome Tautomerase (DCT)

Homo sapiens (Human,人)

蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png


相關(guān)產(chǎn)品:

Recombinant Human CLDN18宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human TRIM31宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Mouse Legumain宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Mouse

Recombinant Human SSNA1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human   
操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Histone H4 (Acetyl K8)產(chǎn)品名稱: 乙?;M蛋白H4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

Acetyl-Histone H3 (Lys18)交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來(lái)源: Mouse

ARPC1A產(chǎn)品名稱: 肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型1A抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

ZNF307/ZKSCAN3產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白307抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit

CYP11A1產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞色suP450 11A1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

DOLPP1產(chǎn)品名稱: 長(zhǎng)醇二磷suanmei1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

TNFAIP8L3產(chǎn)品名稱: 腫壞死因子誘導(dǎo)蛋白8樣蛋白3/TNFα-IP 8L3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

Phospho-MYPT1 (Thr696)產(chǎn)品名稱: 肌球蛋白磷suanmei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit

Tau產(chǎn)品名稱: 微管相關(guān)蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Rabbit

CIDEC產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞死亡活化蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig   

多巴色素異構(gòu)酶(DCT)重組蛋白人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒GP抗糖蛋白抗體elisa kitHuman anti-glycoprotein antibody,GP ELISA Kit

人抗肽?;?/span>suan脫亞胺mei4型(PADI4)抗體ELISA試劑盒PADI4抗肽?;眘uan脫亞胺mei4型ELISA試劑盒Human Protein-arginine deiminase type-4(PADI4)antibody ELISA Kit

人抗髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白抗體(IgG)ELISA試劑盒IgG抗髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白抗體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human myelin oligodendrocyte glycoprotein antibody IgG ELISA Kit

人抗髓磷脂相關(guān)糖蛋白(MAG)抗體ELISA試劑盒MAG抗髓磷脂相關(guān)糖蛋白elisa檢測(cè)試劑盒Human anti myelin-associated glycoprotein(MAG)antibody ELISA kit

人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA)ELISA試劑盒AMA IgA抗髓磷脂抗體IgAelisa kitHuman anti-myelin antibody IgA,AMA IgA ELISA Kit  
注意事項(xiàng):

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí)。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作 

 


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