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Nei內(nèi)切核酸酶Ⅷ樣蛋白1(NEIL1)重組蛋白

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

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更新時間:2023-03-20 19:41:37瀏覽次數(shù):271次

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實驗 英文名稱 Recombinant Nei Endonuclease VIII Like Protein 1 (
物種 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生
Nei內(nèi)切核酸酶Ⅷ樣蛋白1(NEIL1)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:11-β-羥基類固醇脫氫mei1(HSD11b1)重組蛋白英文名稱:Recombina 11-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 1 (HSD11b1)11-β-羥基類固醇脫氫mei1(HSD11b1)重組蛋白英文名稱:Recombina 11-Beta-Hydroxysteroid Dehydr

商品介紹:

NEI1; hFPG1; FPG1; DNA-(apurinic or apyrimidinic site) lyase Neil1; Nei-like protein 1; DNA glycosylase/AP lyase Neil1

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::分泌

預(yù)測分子量:34.6kDa

實際分子量:35kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Ser43~Ala314 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl, pH8.0, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點:10.3

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

 

公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

物種

Nei內(nèi)切核酸酶Ⅷ樣蛋白1(NEIL1)重組蛋白

Recombinant Nei Endonuclease VIII Like Protein 1 (NEIL1)

Homo sapiens (Human,人)

蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png



相關(guān)產(chǎn)品:

Recombinant Human IF4B標(biāo)簽: His tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg表達(dá)區(qū)間: 134-326,364-401aa

Recombinant Human PSMB1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human SRP9宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human IL-4宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human   
操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

TAGLN2產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse

IFN gamma產(chǎn)品名稱: 干擾素-γ/IFN-γ抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

phospho-PKC beta 1 + PKC beta 2(Thr500)產(chǎn)品名稱: 蛋白激酶C(T500)抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Horse, Rabbit

hnRNP K產(chǎn)品名稱: 異質(zhì)核糖核蛋白K抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit

human CD19產(chǎn)品名稱: 小鼠抗人CD19單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

CD163產(chǎn)品名稱: CD163抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

phospho-eIF4E (Ser209)產(chǎn)品名稱: 真核翻譯起始因子4E抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Zebrafish

TWIST產(chǎn)品名稱: TWIST蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

Phospho-HSP27 (Ser15)產(chǎn)品名稱: 熱休克蛋白27抗體交叉反應(yīng): Human, Cow, Sheep

ACPL2產(chǎn)品名稱: 酸性磷酸酶樣蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep   

Nei內(nèi)切核酸酶Ⅷ樣蛋白1(NEIL1)重組蛋白人自然抗性相關(guān)巨噬細(xì)胞蛋白2(NRAMP-2)ELISA試劑盒NRAMP-2自然抗性相關(guān)巨噬細(xì)胞蛋白2elisa酶聯(lián)免疫試劑盒Human natural resistance-associated macrophage protein 2,NRAMP2 ELISA kit

人樁蛋白(Pax)ELISA試劑盒Pax樁蛋白elisa檢測試劑盒Human paxillin,Pax ELISA Kit

人轉(zhuǎn)移因子(TF)ELISA試劑盒TF轉(zhuǎn)移因子elisa kitHuman Transfer factor,TF ELISA Kit

人轉(zhuǎn)錄中介因子1-β(TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B)ELISA試劑盒TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B轉(zhuǎn)錄中介因子1-βELISA試劑盒Human Transcription intermediary factor 1-beta ELISA kit

人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)ELISA試劑盒ATF-1轉(zhuǎn)錄因子抗體-1elisa酶聯(lián)免疫試劑盒Human activating transcription factor-1,ATF-1 ELISA Kit  
注意事項:

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作 

 


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