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類固醇5α還原酶1(SRD5a1)重組蛋白

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時間:2023-03-20 20:06:36瀏覽次數(shù):188次

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Steroid 5 Alpha Reductase 1 (SRD5a1)
物種 Mus musculus (Mouse,小鼠) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生
類固醇5α還原酶1(SRD5a1)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:17-β-羥基類固醇脫氫mei10(HSD17b10)重組蛋白英文名稱:Recombina 17-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 10 (HSD17b10)17-β-羥基類固醇脫氫mei10(HSD17b10)重組蛋白英文名稱:Recombina 17-Beta-Hydroxysteroid Deh

公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

物種

類固醇5α還原酶1(SRD5a1)重組蛋白

Recombinant Steroid 5 Alpha Reductase 1 (SRD5a1)

Mus musculus (Mouse,小鼠)

商品介紹:

3-Oxo-5 Alpha-Steroid Delta 4-Dehydrogenase Alpha 1

酶與激酶

物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜

預(yù)測分子量:59.3kDa

實(shí)際分子量:57kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Met1~Leu255 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):8.7

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png



相關(guān)產(chǎn)品:

Recombinant Human SEPT9宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human HELLS宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human TDP2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human ARNT宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human   

注意事項(xiàng):

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作                                            

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Phospho-CRTC1 (Ser151)產(chǎn)品名稱: CREB轉(zhuǎn)錄共激交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

AFP(A2)產(chǎn)品名稱: 甲胎蛋白單克隆抗體(包被)交叉反應(yīng): Human, Rat

E2F1產(chǎn)品名稱: 轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

CYP2U1產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞色素P450 2U1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

IL17E產(chǎn)品名稱: 白介素-17E抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

FOXN1產(chǎn)品名稱: 叉頭蛋白N1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

TRF2產(chǎn)品名稱: 端粒結(jié)合蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Rabbit

Histone H3 (CT)交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來源: Rabbit

RNF3產(chǎn)品名稱: 環(huán)指蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

UCP-1產(chǎn)品名稱: 線粒體脫偶連蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep   

類固醇5α還原酶1(SRD5a1)重組蛋白人脂磷壁suan(LTA)ELISA試劑盒LTA脂磷壁suanELISA試劑盒Human lipoteichoic acids,LTA ELISA Kit

人脂肪細(xì)胞脂肪suan結(jié)合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒aFABP脂肪細(xì)胞脂肪suan結(jié)合蛋白elisa酶聯(lián)免疫試劑盒Human adipocyte fatty-acid binding protein,AFABP ELISA Kit

人脂肪suan結(jié)合蛋白4(FABP-4)ELISA試劑盒FABP-4脂肪suan結(jié)合蛋白4elisa檢測試劑盒Human FABP-4 ELISA Kit

人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)ELISA試劑盒ADRP脂肪分化相關(guān)蛋白elisa kitHuman adipose differentiation-related protein,ADRP ELISA Kit

人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA試劑盒LAM脂阿拉伯甘露聚糖ELISA試劑盒Human Lipoarabinomannan,LAM ELISA Kit 


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