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TE-10現(xiàn)貨供應(yīng)操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

資源名稱

TE-10現(xiàn)貨供應(yīng)

種屬  人食管癌細(xì)胞

類型  食管癌

提供形式  P4-5代T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基  90%DMEM+10%FBS

生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng)

詳細(xì)說(shuō)明

動(dòng)物種別  人

供應(yīng)限制  暫不供應(yīng)

描述  ***

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降

1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。

TE-10現(xiàn)貨供應(yīng)注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力，請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。130643-500    烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶    500U

18-0570-48    唾液酸測(cè)試盒 ( 帶 SA 標(biāo)準(zhǔn) )    48 T

130907-50    脫脂奶粉 ( 雜交 )    50g

CAS9003-98-9    脫氧核糖核酸酶 ( 牛胰 )    25mg

131047-5    脫氧膽酸鈉    5g

CAS302-95-4    脫氧膽酸鈉    10g

CAS83-44-3    脫氧膽酸    10g

CAS14375-45-2    脫落酸    25mg

140596-100    兔抗山羊 IgG(H+L)，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記    100 μL

131152-300    兔抗雞 IgY，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記    300μL

100202-100    兔抗 His 標(biāo)簽多抗，HRP 標(biāo)記    100μL

120534-20    兔抗 GST 標(biāo)簽多抗    20μL

CAS51005-14-2    兔肌動(dòng)蛋白    1mg

CAS9005-65-6    吐溫 -80    100mL

CAS9005-67-8    吐溫 -60    500mL

CAS9005-64-5    吐溫 -20    100mL

70603-100    土壤腐殖酸清除劑    100mL

90704-50    土壤 RNAout    50 次

60701-30    土壤 DNAout    30 次

60701-100    土壤 DNAout    100 次