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小容量搖瓶機(jī)在菌種培養(yǎng)中的使用方法
在進(jìn)行小容量搖瓶機(jī)試驗(yàn)前，首先檢查小容量搖瓶機(jī)各部件，檢查氣源、電源、管路、壓力表、密封等是否正常，要求實(shí)驗(yàn)人員在操作前必須對小容量搖瓶機(jī)的各個(gè)按鈕，流程熟練掌握，詳細(xì)閱讀搖瓶機(jī)說明書，及實(shí)驗(yàn)室儀器安全操作規(guī)程。掌握了小容量搖瓶機(jī)的基本操作要領(lǐng)后，逐步按以下步驟進(jìn)行搖瓶機(jī)細(xì)菌培養(yǎng)試驗(yàn)：
1、小容量搖瓶機(jī)復(fù)蘇：
根據(jù)所培養(yǎng)的細(xì)菌選擇適宜的培養(yǎng)基，大部分細(xì)菌在LB培養(yǎng)基中在超凈工作臺先用1毫升左右的適宜的培養(yǎng)基溶解冷凍菌，然后轉(zhuǎn)移到10毫升中試管（放入4毫升液體培養(yǎng)基）中，一般在37攝氏度搖床靜止或低轉(zhuǎn)速培養(yǎng)12小時(shí)或者過夜（溫度取決于所培養(yǎng)的細(xì)菌適宜生長的溫度）。
2、搖瓶機(jī)平板劃線培養(yǎng)：
在平板（瓊脂+液體培養(yǎng)基）劃線，放37攝氏度培養(yǎng)箱培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)6小時(shí)~12小時(shí)，在平板上觀察是否形成了單菌落。
3、小容量搖瓶機(jī)挑單菌落：
在超凈臺中挑選典型單菌落，置入10毫升中試管（內(nèi)有5毫升液體培養(yǎng)基）中，在37攝氏度搖床，轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)培養(yǎng)12小時(shí)或者過夜，肉眼能看到試管渾濁。
4、小容量搖瓶機(jī)按照1：20的比例將中試管中的菌液移到250毫升三角瓶（放入100毫升液體培養(yǎng)基），培養(yǎng)條件同前。注意：所有的接種操作均需要在層流罩中，培養(yǎng)基應(yīng)無菌。