骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是存在于骨髓腔內(nèi)具有很強(qiáng)增殖 能力及多向分化潛能的一類成體干細(xì)胞，在一定條件下其不僅可以分化為同源于中胚層的間質(zhì)細(xì)胞，還可以誘導(dǎo)分化為骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、上皮樣細(xì)胞、 心肌細(xì)胞、肝細(xì)胞等。近年來(lái)隨著組織工程技術(shù)的快速發(fā)展，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外分離、培養(yǎng)及其增殖特 性的相關(guān)研究逐漸受到越來(lái)越多研究人員的關(guān)注。目前， 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞常用的分離培養(yǎng)方法有全貼壁篩選培 養(yǎng)法、密度梯度離心法和流式細(xì)胞儀分離法等，由于骨髓液中存在大量的紅細(xì)胞，近幾年開始有人向骨髓液中加入紅細(xì)胞裂解液來(lái)提高分離純化骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的效率，以期獲得純度高、數(shù)量多的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)探索了如何通過(guò)紅細(xì)胞裂解液法獲得骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，及骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞各代細(xì)胞的增殖能力。
紅細(xì)胞裂解液法分離純化骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，有以下優(yōu)點(diǎn)：
①、經(jīng)紅細(xì)胞裂解液處理后的骨髓液內(nèi)含有大量各種促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的因子。紅細(xì)胞及血小板的胞漿內(nèi)含有豐富的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子，這些細(xì)胞因子可促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成集落的簇狀生長(zhǎng)，為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生長(zhǎng)提供更適應(yīng)的微環(huán)境，以利于骨髓間充質(zhì)干 細(xì)胞的增殖。
②、增加骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的濃度，提高骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖速度。經(jīng)紅細(xì)胞裂解液處理后，骨髓液內(nèi)細(xì)胞雜質(zhì)明顯減少，通過(guò)離心純化，可以得到純度更高的含有骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的骨髓液，進(jìn)而 可以明顯較少骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的原代培養(yǎng)時(shí)間，提高 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖速度。
③、早期促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的貼壁。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)經(jīng)紅細(xì)胞裂解液處理后，早期骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的貼壁細(xì)胞數(shù)量明顯較未經(jīng)紅細(xì) 胞裂解液處理所獲得的數(shù)量多?？赡艿脑?yàn)榻?jīng)紅細(xì)胞 裂解液處理后骨髓液內(nèi)紅細(xì)胞及血小板數(shù)量極少，影響骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞貼壁的雜質(zhì)相對(duì)減少，為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞貼壁保留出更多的空間，利于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的早期貼壁。
上述實(shí)驗(yàn)所采用的紅細(xì)胞裂解液法所培養(yǎng)出的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在生長(zhǎng)至13d左右時(shí)細(xì)胞成典型的長(zhǎng)梭形，排列規(guī)則均一，幾乎無(wú)其他雜質(zhì)細(xì)胞存在，細(xì)胞融合接近100%；經(jīng)傳代細(xì)胞培養(yǎng)比較不同代數(shù)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線時(shí)，發(fā)現(xiàn)P4代細(xì)胞具有*的增殖活性，適宜 于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究；通過(guò)細(xì)胞免疫熒光及流式細(xì)胞儀鑒定所培養(yǎng)的細(xì)胞表面分子CD44表達(dá)陽(yáng)性，CD34 表達(dá)陰性，符合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞生物學(xué)特性。故紅細(xì)胞裂解液法也能夠分離出高純度的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，其具有穩(wěn)定的生物學(xué)活性，較好的增殖活性，是一種操作簡(jiǎn)便、易于復(fù)制的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離方法。
紅細(xì)胞裂解液相關(guān)產(chǎn)品：
| 貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
| abs9101 | 紅細(xì)胞裂解液 | 100ml/500ml |
| abs9241 | 紅細(xì)胞裂解液，10X | 100ml/500ml |
| abs9225 | 組織/細(xì)胞裂解液 (多因子檢測(cè)) | 100ml/500ml |
膠原酶相關(guān)產(chǎn)品：
| 名稱 | 貨號(hào) | 膠原酶活性 | 用途 |
| 膠原酶Ⅰ | abs47048000 | 有著初始平衡的膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶的活性。 | 用于上皮、肺，脂肪和腎上腺組織細(xì)胞的分離 |
| 膠原酶Ⅱ | abs47048001 | 含有更高的梭菌蛋白酶活性。 | 用于肝臟，骨，甲狀腺，心臟和唾液腺組織細(xì)胞的分離 |
| 膠原酶Ⅲ | abs47048002 | 次級(jí)蛋白酶的含量較低但是含有胰蛋白酶活性。 | 用于消化組織中連接部分使其成為單個(gè)細(xì)胞，用于哺乳動(dòng)物組織細(xì)胞解離 |
| 膠原酶Ⅳ | abs47048003 | 含有低水平的胰蛋白酶活性以限制膜蛋白和受體的損傷，但是含有正常水平的上述膠原酶的活性成分。 | 用于胰島初次分離制備 |
| 膠原酶Ⅴ | abs47048004 | 部分純化，含有較高的膠原酶和酪蛋白酶活性。 | 用于胰腺小島組織的分離，將結(jié)締組織分離成單個(gè)細(xì)胞 |
胰蛋白酶相關(guān)產(chǎn)品 ：
| 貨號(hào) | 名稱 |
| abs47014938 | 胰蛋白酶-EDTA溶液 |
| abs9154 | 胰蛋白酶（牛胰腺） |
| abs47047375 | 胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) 不含酚紅 |
| abs44073474 | 重組牛胰蛋白酶 |
| abs47014937 | Trypsin (0.25%), Phenol Red |
| abs47014936 | 豬源胰蛋白酶1:250 |
| abs47014940 | 胰蛋白酶,蛋白測(cè)序級(jí) |
| abs47014939 | 胰蛋白酶,組織培養(yǎng)級(jí) |
本文參考文獻(xiàn)：
紅細(xì)胞裂解液法體外分離培養(yǎng)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 張衛(wèi)東，章方彪，史宏?duì)N，譚榮邦，葉 鋼，李廣宇，潘 樞，孫 飛(揚(yáng)州大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院，江蘇省揚(yáng)州市 225001)
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