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產(chǎn)品推薦:支原體染色檢測(cè)試劑盒

閱讀:877      發(fā)布時(shí)間:2022-2-28
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Absin 支原體染色檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品詳情

1. 基本屬性



中文名稱(chēng)支原體染色檢測(cè)試劑盒
英文名字Mycoplasma Stain Assay Kit
別名Hoechst染色來(lái)檢測(cè)支原體
產(chǎn)品貨號(hào)abs9252
產(chǎn)品規(guī)格100T
產(chǎn)品組份固定液,Hoechst染色液,抗熒光淬滅封片液
保存建議2~8℃避光保存,有效期12個(gè)月。
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)


2. 產(chǎn)品描述



支原體染色檢測(cè)試劑盒可用于在培養(yǎng)細(xì)胞中對(duì)支原體或其它原核生物進(jìn)行原位染色檢測(cè)。主要用于檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞中是否存在支原體污染。
培養(yǎng)細(xì)胞中的細(xì)菌污染、酵母污染或霉菌污染都在光學(xué)顯微鏡下可見(jiàn),但支原體污染在光學(xué)顯微鏡下不可見(jiàn),必須通過(guò)特定的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)。
檢測(cè)支原體污染的方法有很多種,包括支原體分離培養(yǎng)、支原體特異酶檢測(cè)、RT-PCR檢測(cè)以及DNA熒光染色檢測(cè)。該試劑盒是通過(guò)Hoechst染色來(lái)檢測(cè)支原體,可快速、有效、高靈敏度地檢測(cè)支原體污染。
如果發(fā)現(xiàn)有支原體污染,建議更換無(wú)污染的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。該試劑盒如用于六孔板樣品檢測(cè),至少可以檢測(cè)100個(gè)樣品。

3. 操作步驟



1、Hoechst 染色試劑對(duì)人體有害,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
2、固定液含有冰乙酸,有刺激性氣味,宜在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行固定操作。
3、熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。
4、檢測(cè)支原體前最好用不含抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng) 2~3 代,這樣更容易檢測(cè)出支原體,因?yàn)橐恍┛股乜梢砸种浦гw生長(zhǎng)。

4. 用法說(shuō)明



1、細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:
(1)對(duì)于貼壁細(xì)胞,在六孔板或其它多孔板內(nèi)或蓋玻片上培養(yǎng)細(xì)胞至 50%-80%滿(mǎn)。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)滿(mǎn)會(huì)導(dǎo)致很難判斷是否存在支原體污染。
(2)對(duì)于懸浮細(xì)胞,離心沉淀細(xì)胞,取少量細(xì)胞做細(xì)胞涂片,空氣中充分晾干。
2、用 PBS 按照 1:10 稀釋 Hoechst 染色液(1 體積 Hoechst 染色液加入 9 體積 PBS)。稀釋后的 Hoechst 染色液宜在 24h 內(nèi)使用。
3、加適量固定液固定 10~20min。 對(duì)于六孔板的一個(gè)孔,加入 1mL 固定液。確保固定液充分覆蓋樣品,固定前切勿對(duì)細(xì)胞進(jìn) 行洗滌。對(duì)于貼壁細(xì)胞,固定前需去除培養(yǎng)液。
4、去除固定液,空氣中晾干。
5、加適量 10 倍稀釋的 Hoechst 染色液室溫染色 10~30min。 對(duì)于六孔板的一個(gè)孔,加入 1mL 染色液。確保染色液充分覆蓋樣品,染色時(shí)注意避光。可以用鋁箔紙避光。
6、去除染色液,空氣中晾干。
7、滴加試劑盒中提供的抗熒光淬滅封片液,封片后熒光顯微鏡下觀(guān)察藍(lán)色熒光。 熒光顯微鏡觀(guān)察時(shí)需 400 倍或 1000 倍放大觀(guān)察(需使用油鏡)。 沒(méi)有支原體污染或其它原核生物污染的細(xì)胞樣品,僅觀(guān)察到細(xì)胞核的藍(lán)色熒光,線(xiàn)粒體 DNA 不會(huì)被染色。
有支原體污染的細(xì)胞樣品可觀(guān)察到細(xì)胞核周?chē)⒘罨蚪z狀藍(lán)色熒光。 支原體污染嚴(yán)重的細(xì)胞可以觀(guān)察到大量微粒狀或絲狀藍(lán)色熒光。
有細(xì)菌、酵母或霉菌污染的情況雖然 Hoechst 染色也會(huì)呈陽(yáng)性,但細(xì)菌、酵母或霉菌污染在 光學(xué)顯微鏡下可以觀(guān)察到,而支原體觀(guān)察不到,由此可以初步區(qū)分是支原體還是其它微生物。
如有必要進(jìn)一步鑒定,可以通過(guò)把支原體接種培養(yǎng)和 RT-PCR 等方法進(jìn)行進(jìn)一步檢測(cè)。


5. 訂購(gòu)信息


貨號(hào)名稱(chēng)規(guī)格
abs9252支原體染色檢測(cè)試劑盒100T



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