充分發(fā)掘微孔板讀板機特點及優(yōu)勢 ——進行更高水平的細胞因子檢測-Molecular Devices

時間：2018-9-7 閱讀：794


充分發(fā)掘微孔板讀板機特點及優(yōu)勢 ——進行更高水平的細胞因子檢測
，目前人類許多疾病的發(fā)生過程都或多或少與細胞因子變化有關(guān)系，如腫瘤、糖尿病、神經(jīng)退行性疾病等等。細胞因子（Cytokine,CK）其實就是一類能在細胞間傳遞信息，可分為白細胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子、集落刺激因子、生長因子和趨化性細胞因子等六類。正常情況下，細胞因子的表達和分泌受機體嚴格的調(diào)控，但在病理狀態(tài)下，細胞因子會出現(xiàn)異常性表達。例如細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的變化，其發(fā)生過程涉及到細胞膜或細胞內(nèi)受體接受細胞外的分子信號刺激，這些細胞外的分子信號就包括細胞因子、激素、生長因子等等，我們可以通過細胞因子的檢測來診斷某種疾病的發(fā)生。細胞因子檢測主要基于免疫學(xué)檢測方法、生物學(xué)檢測方法和分子生物學(xué)檢測方法，三種檢測方法各有優(yōu)劣，如生物學(xué)檢測方法中利用動物模型來檢測細胞因子的含量變化，可反映動物體內(nèi)生物活性、參考價值大，不足之處在于成本較高、步驟繁瑣等，所以應(yīng)用較少。目前較為被大家所常用的方法是免疫學(xué)檢測法和分子檢測法，而免疫學(xué)檢測方法更為常用。包括ELISA法、免疫斑點法、免疫熒光法、RIA檢測方法等，其中廣泛使用的就是ELISA法。與之配套檢測的多功能酶標(biāo)儀/檢測系統(tǒng)，因其具有光吸收、熒光、發(fā)光、熒光偏振和時間分辨熒光等多種檢測功能，我們不僅可以利用其光吸收功能針對細胞因子進行ELISA，也可借助其熒光功能或熒光偏振功能針對微量表達的細胞因子進行高通量、高靈敏度的檢測*。市面上已相繼開發(fā)出針對不同需求不同目的應(yīng)用的ELISA試劑盒。

如Sword ELISA Boosters，是由Sword Diagnostics 公司開發(fā)出的新一代熒光ELISA 檢測技術(shù)，它可直接替代作為金標(biāo)準(zhǔn)的傳統(tǒng)光吸收ELISA 檢測試劑，將靈敏度提升30倍。原理是基于Sword 分子在辣根過氧化物酶 (HRP) 存在下轉(zhuǎn)化為共振拉曼活性底物，共振拉曼信號則在微孔讀板機上檢測。由于在低濃度下有著*水平的酶/底物相互作用，產(chǎn)生出更多的共振拉曼活性分子，從而增強了實驗的性能表現(xiàn)。

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傳統(tǒng)的ELISA技術(shù)雖然在靈敏度上不及熒光及熒光偏振等方法，但是新的技術(shù)的加入使得較傳統(tǒng)檢測的時間大大縮短，如Abcam公司的 SimpleStep ELISA 試劑盒，它可將 ELISA 實驗時間從 260 分鐘減少到 90 分鐘，保證實驗的靈敏度和重復(fù)性。


以上可見，多重檢測手段結(jié)合全新檢測技術(shù)，能讓我們在經(jīng)典方法的基礎(chǔ)上持續(xù)發(fā)掘出更靈敏、更快捷的方式，以滿足我們更高的檢測需求。

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