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f. sight 熒光輔助分選加快重組 CHO 細(xì)胞的克隆選擇

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生物治療藥物和治療性蛋白質(zhì)的市場在 2018 年價值 931.4 億美元,預(yù)計到 20221 年底將增長近一倍。然而,對高產(chǎn)哺乳動物 CHO 細(xì)胞株的選擇仍然代表著生物制藥生產(chǎn)過程開發(fā)中的主要瓶頸 2。因此,開發(fā)新的高通量方法以有效和具有成本效益的方式選擇高表達(dá)的 CHO 細(xì)胞株變得越來越重要。使用多輪甲氨蝶呤 (MTX) 或蛋氨酸亞砜亞胺 (MSX) 誘導(dǎo)的基因擴(kuò)增和有限稀釋的傳統(tǒng)方法效率低下,費(fèi)時,費(fèi)力,并且并不總是能產(chǎn)生具有所需生產(chǎn)水平的克隆。FACS 的篩選方法可以提高效率和通量,但需要大量的資金投入,密集的操作員培訓(xùn)和專門的人員。 FACS 工作流由于與細(xì)胞直接接觸的非一次性組件而容易受到交叉污染。此外,對于對流體壓力敏感的細(xì)胞株,細(xì)胞可能顯示出較低的生存力,并且在 FACs 篩選后不能很好地恢復(fù)。
 

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