小動物活體成像系統(tǒng)

小動物活體成像系統(tǒng)—參數(shù)和配置

—MIIS產(chǎn)品線

Molecular Devices MIIS()是一套微光學(xué)系統(tǒng)，這套系統(tǒng)能夠幫助您完成那些需要從小動物或植物中檢測微弱熒光和發(fā)光信號的研究應(yīng)用。

Molecular Devices MetaMorph-MIIS是一個圖像獲取和分析軟件。尤其特殊的是此軟件可以控制Z軸定位，濾光片轉(zhuǎn)輪和光源，并且還能獲取時間序列和進(jìn)行高速成像。

可選擇高靈敏的EMCCD照相機(jī)，深度制冷CCD和強(qiáng)大的sCMOS照相機(jī)作為檢測器。使用高亮度LED來檢測熒光信號。LED光源避免了紫外波段常見的光毒性，并提供了*的穩(wěn)定性。 

小動物體內(nèi)成像系統(tǒng)特點(diǎn)

可選擇對您實驗*化的照相機(jī)

熒光光源和發(fā)光檢測

使高速圖像獲取成為可能

高度可擴(kuò)展性

—軟件介紹

軟件MetaMorph-MIIS / MVDOC-MIIS共有參數(shù)

照相機(jī)控制：

● 曝光時間設(shè)置: 手動, 自動多重選擇

● 特定捕獲區(qū)域: 全視野，1/4視野及客戶自定義范圍

● 像素融合: ×1·×2·× 4·×8 (取決于所選照相機(jī))

● 保存和讀取每個拍攝設(shè)置

● EM增益: 1-1000倍 (EMCCD型)

動態(tài)分析功能

● 亮度和面積變化量的圖表，平鋪顯示，影片制作，還有多圖像同步操作疊加功能

● 明場圖像和熒光/發(fā)光信號疊加，亮度測量，文字，時間標(biāo)記箭頭等MIIS工具欄

● 可選擇項目來定制工具欄

● 工具欄上*必須的功能是實驗步驟功能，分析步驟是錄制的且是可執(zhí)行的

● 時間序列成像

● 高速成像

● 自發(fā)熒光消減和均勻處理功能

● 線掃描功能

● 自動對焦功能

MetaMorph-MIIS 專有功能

● 隔熱板溫度記錄（可做圖）

● 多孔板分析（grid分析）

應(yīng)用實例（一）

● 注射細(xì)胞: HEK293 (活細(xì)胞, 弱熒光素酶表達(dá))

● 表達(dá)熒光素酶: ELuc (祖母綠Luc), FLuc (螢火蟲Luc)

● 緩沖液: HBSS (LifeTechnologies)

● 發(fā)光底物: 1 mg D-Luciferin (Wako, D-Luciferin 鉀鹽) / 1 mg Akalumine (Wako)

※小鼠皮下注射細(xì)胞, 緩沖液,發(fā)光底物混合物

● 小鼠: BALB / cSlc-nu / nu (雌性, 5周)

● 圖像描述: zui左明場圖像, 左數(shù)第二張為發(fā)光圖像. 右數(shù)第二張是明場和發(fā)光圖像疊加 。注意紅圈區(qū)域; 左側(cè)兩塊區(qū)域為-ELuc 表達(dá)細(xì)胞 (左上 -Akalumine,左下 -D-Luciferin),右側(cè)兩塊區(qū)域為 –Fluc 表達(dá)細(xì)胞 (右上 -Akalumine, 右下-D-Luciferin)

● 照相機(jī)設(shè)置: 曝光時間(明場5毫秒, 發(fā)光60秒, 無EM增益)

● 圖片描述: 左為肝部ELuc 圖像,觀察發(fā)光 Akarumine 1mg, 右為肝部D-Lucirerin圖像, 觀察發(fā)光 D-luciferin 10mg

● 照相機(jī)設(shè)置: 曝光時間60秒, EM 增益 × 1000
 

應(yīng)用實例（二）

● 加入細(xì)胞: HEK293 (活細(xì)胞, 弱熒光素酶表達(dá))

● 表達(dá)熒光素酶: ELuc (祖母綠 Luc), Fluc (螢火蟲 Luc)

● 緩沖液: HBSS (LifeTechnologies)

● 發(fā)光底物: 1 mg of D-Luciferin (Wako, D-Luciferin 鉀鹽)

● 檢測原理：ADRB2 and β-Arrestin2 融合熒光素酶 (ELuc) 片段拆分加入到每種藥物中(配體)，在熒光素酶互相

接近時即可發(fā)射信號

● 加入藥物: 異丙腎上腺素(配體), 普萘洛爾(抑制配體功能)

● 照相機(jī)設(shè)置: 曝光時間10秒, EM 增益 × 800

應(yīng)用實例（三）

● 當(dāng)使用EM 增益時，能夠使用1/3的曝光時間進(jìn)行點(diǎn)檢測 (對于希望縮短曝光時間的應(yīng)用，可使用有效EM ex模式) 。

左: 3分鐘曝光 (EM增益1000倍), 右: 10 分鐘曝光(EM增益關(guān))

● 注射細(xì)胞: HEK293 (活細(xì)胞,熒光素酶穩(wěn)定表達(dá))

● 表達(dá)熒光素酶: NanoLuc (Promega)

● 緩沖液: HBSS (LifeTechnologies)

● 發(fā)光底物: 10 μL Furimazine (Promega)

● 將混合發(fā)光底物的培養(yǎng)基注射到小鼠皮下

● 小鼠: BALB / cSlc-nu / nu (雌性, 5 周) ，每秒鐘6對 * 1 (明場和化學(xué)發(fā)光都是60 毫秒曝光) 通過使用NanoLuc對

活動小鼠進(jìn)行的實時拍攝

● 照相機(jī)設(shè)置: 曝光時間60毫秒, EM增益 × 700