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技術(shù)文章

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實驗細節(jié)要點

閱讀:905          發(fā)布時間:2018-11-27

      細節(jié)決定成敗,在elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實驗其實說起來很簡單,而一個小小的誤差就能夠影響到實驗,想要一次性的通過實驗,真是太難了。"臣妾做不到啊!"下面小編就幾個細節(jié)簡單的大家說一下,希望能幫助到你們。

1.試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。

2.加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結(jié)合物或底物時,*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的 “預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。

3.洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響zui后的酶標儀讀數(shù)。

4.孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。

5.反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。

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