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小鼠小梁網細胞

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更新時間:2025-02-19 17:48:20瀏覽次數(shù):238

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X1051 應用領域 化工
主要用途 產品僅供科研使用    
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動物細胞銅ATP(Cu++ -ATPase)活性比色法量檢測試劑盒 20次
動物組織銅ATP(Cu++ -ATPase)活性比色法量檢測試劑盒

詳細介紹

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產品屬性:  

產品名稱

規(guī)格

貨號

小鼠小梁網細胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1051

商品介紹:

名稱    小鼠小梁網細胞  

2.組織來源:眼球

3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

小鼠小梁網細胞分離自眼球組織;小梁網由角膜基質纖維、后界膜和角膜內皮向后擴展而成,覆蓋在鞏膜靜脈竇的內側。小梁網細胞在眼內壓調節(jié)中起著關鍵作用;小梁網細胞內有特定的神經遞質和神經肽受體,其中包括腎上腺素、乙酰膽堿和神經肽Y。青光眼是由于眼內壓力升高而造成的一種不可逆致盲眼病,小梁網細胞的體外培養(yǎng)是青光眼病因學研究的重要手段之一。在小梁網細胞中,一長串的血管活性多肽和生長因子能夠觸發(fā)細胞內信號傳導機制,小梁網細胞可合成不同類型的細胞外基質蛋白以及金屬蛋白酶。形態(tài)學觀察可見,剛從組織塊長出的原代細胞,形態(tài)各異,多數(shù)呈星狀或不規(guī)則形。細胞有胞突,核橢圓形,胞體肥大,胞漿豐富,且可見吞噬顆粒。隨著細胞的增生及相互融合為單層,細胞的形態(tài)趨于一致。胞漿的色素顆粒及胞突消失,排列緊密呈類似上皮細胞的扁橢圓形或不規(guī)則形。胞體透亮,包膜清晰。

5.方法簡介:

實驗室分離的小鼠小梁網細胞采用組織貼塊法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的小鼠小梁網細胞NSE(神經元特異性烯醇化酶)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件PLL0.1mg/ml

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產品貨號CM-M115

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)梭形、多角形

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大鼠 LTA 基因全長ORF克隆

大鼠 TNFSF4 基因全長ORF克隆

大鼠 IgG2B 基因全長ORF克隆

大鼠 FGF11 基因全長ORF克隆

大鼠 FGF9 基因全長ORF克隆

大鼠 HFE2 基因全長ORF克隆

大鼠 ENG 基因全長ORF克隆

大鼠 TGFBR2 基因全長ORF克隆

大鼠 BMPR1A 基因全長ORF克隆

大鼠 ACVR1B 基因全長ORF克隆

小鼠小梁網細胞0.312-20 ng/mL 人受磷蛋白(PLN)ELISA試劑盒

78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Cadherin-1

Andrade氏糖類肉湯 英文名稱:Andrade’s Carbohydrate Broth 產品規(guī)格:250g

0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Amelogenin, X isoform

1.56-100 ng/mL 人神經調節(jié)蛋白1(NRG-1)ELISA試劑盒

1.56-100 ng/mL 人熱穩(wěn)定性腸毒素受體(hSTAR)ELISA試劑盒

衛(wèi)矛醇半固體 英文名稱: 產品規(guī)格:20支

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Growth arrest-specific protein 6

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Sulfotransferase 1A1

精雙水解肉湯 英文名稱: 產品規(guī)格:20支

 


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