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DC2.4 (小鼠骨髓來源樹突狀細胞)

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更新時間:2025-02-19 18:14:25瀏覽次數:291

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產品簡介

供貨周期 現貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0537 應用領域 化工
主要用途 產品僅供科研使用    
DC2.4 (小鼠骨髓來源樹突狀細胞)的相關*:10倍PCR*緩沖液 100次
一步法PCR反應液 20次
超白金TAG DNA聚合 200 U
三脫氧核糖核苷酸(dNTPs)混合液 2.5或10mM/毫升
一步法平端PCR反應液 50次
一步法熒光定量PCR反應液 20次

詳細介紹

產品屬性: 

產品名稱

規(guī)格

貨號

DC2.4 (小鼠骨髓來源樹突狀細胞)

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0537

商品介紹:

名稱    DC2.4 (小鼠骨髓來源樹突狀細胞) 

別稱DC 2.4

生長特性懸浮細胞

生長培養(yǎng)基DMEM10% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:2-1:4

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO25%

溫度:37℃

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

QQ截圖20210907103850.png

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 RAB5A 基因全長ORF克隆

 EBAG9 基因全長ORF克隆

 RAB39B 基因全長ORF克隆

 RGS2 基因全長ORF克隆

 GLTP 基因全長ORF克隆

 COMMD10 基因全長ORF克隆

 RERG 基因全長ORF克隆

 CSRP3 基因全長ORF克隆

 MID1IP1 基因全長ORF克隆

 EEF1E1 基因全長ORF克隆

DC2.4 (小鼠骨髓來源樹突狀細胞)5 mg Rhodamine 123 Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

250mL Carbonate Buffer(鹽緩沖液),0.5M,pH9.6   Carbonate Buffer,0.5M,pH9.6   常溫保存

100mL 電泳級甘油 Glycerol,EG 常溫

2 ug pGZ pGZ 低溫運輸,-20℃保存

瓊脂培養(yǎng)基K(XLD瓊脂) Agar Medium K(Xylose,Lysine,Dexycholate Agar) 250g

1瓶 HPAC細胞株 HPAC 低溫運輸和保存

瓷珠菌種保存管(20支) Strain Store Medium 20支/盒

 


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