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大鼠脾淋巴細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-02-19 21:22:24瀏覽次數(shù):318

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X1217 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
大鼠脾淋巴細(xì)胞的相關(guān)*:16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測試劑盒
通用型大腸桿(E. Coli)鑒定 20次
16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測試劑盒
細(xì)核糖體分離試劑盒 20次
糞便細(xì)DNA分離試劑盒 50次
細(xì)凍存培養(yǎng)基 100毫升

詳細(xì)介紹

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

大鼠脾淋巴細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1217

商品介紹:

名稱    大鼠脾淋巴細(xì)胞   

2.組織來源:脾臟

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介:

大鼠脾淋巴細(xì)胞分離自脾臟組織;脾臟是機(jī)體最大的免疫器官,占全身淋巴組織總量的25%,含有大量的淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,是機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫的中心。位于左季肋區(qū)后外方肋弓深處,與911肋相對,長軸與第10肋一致。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰,前方有胃,后方與左腎、左腎上腺毗鄰,下端與結(jié)腸脾溝相鄰,地柔軟的網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞器官。淋巴細(xì)胞(lymphocyte)白細(xì)胞的一種,由淋巴器官產(chǎn)生,機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分。淋巴器官根據(jù)其發(fā)生和功能的差異,可分為中樞淋巴器官(又名初級淋巴器官)和周圍淋巴器官(又名次級淋巴器官)兩類。前者包括胸腺、腔上囊或其相當(dāng)器官(有人認(rèn)為在哺乳動(dòng)物是骨髓)。它們無須抗原刺激即可不斷增殖淋巴細(xì)胞,成熟后將其轉(zhuǎn)送至周圍淋巴器官。后者包括脾、淋巴結(jié)等。成熟淋巴細(xì)胞需依賴抗原刺激而分化增殖,繼而發(fā)揮其免疫功能。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脾淋巴細(xì)胞采用機(jī)械研磨法結(jié)合密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為1×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脾淋巴細(xì)胞經(jīng)過檢測,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號CM-R176

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性懸浮

細(xì)胞形態(tài)圓形

傳代特性不增殖;不傳代

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 EPOR ELISA配對抗體

 Ephrin-A1 / EFNA1 ELISA配對抗體

 CEACAM5 / CD66e ELISA配對抗體

 CD69 ELISA配對抗體

 OSMR / IL-31RB ELISA配對抗體

小鼠 IL6RA / CD126 ELISA配對抗體

小鼠 CD157 / BST1 ELISA配對抗體

 HSP27 / HSPB1 ELISA配對抗體

 SerpinF2 ELISA配對抗體

小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 ELISA配對抗體

大鼠脾淋巴細(xì)胞Bacillus thuringiensis鸚鵡衣原體IgM檢測試劑盒

Bacillus thuringiensis鸚鵡衣原體IgA檢測試劑盒

Bacillus thuringiensis抗II檢測試劑盒

Bacillus thuringiensis抗X檢測試劑盒

Bacillus thuringiensisβ抑制蛋白2檢測試劑盒

Bacillus thuringiensis碳水化合物反應(yīng)原件結(jié)合蛋白檢測試劑盒

Bacillus thuringiensisPCNP檢測試劑盒

Bacillus thuringiensis腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白8樣分子2檢測試劑盒

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