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微血管周細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-02-19 21:26:52瀏覽次數(shù):330

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) GOY-01X1195 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
微血管周細(xì)胞的相關(guān)*:重組逆轉(zhuǎn)錄病毒穩(wěn)態(tài)表達(dá)細(xì)胞克隆凍存試劑盒 50次
重組腺病毒構(gòu)建試劑盒 1套
重組腺病毒包裝試劑盒 1套
通用腺病毒骨架載體(pAdEasy-1) 500納克
通用腺病毒穿梭載體 5微克
腺病毒GFP穿梭載體 5微克

詳細(xì)介紹

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

微血管周細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1195

商品介紹:

名稱    微血管周細(xì)胞   

2.組織來(lái)源:微血管組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

微血管周細(xì)胞分離自微血管組織;周細(xì)胞(pericyte)又稱Rouget細(xì)胞和壁細(xì)胞,是一種包圍全身毛細(xì)血管和靜脈中內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞,可以收縮。周細(xì)胞嵌入毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的基膜中,通過(guò)物理接觸和旁分泌信號(hào)與內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞通訊,監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細(xì)胞的成熟過(guò)程。此外,周細(xì)胞還具有調(diào)控毛細(xì)血管血流量、細(xì)胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用,其多功能性是目前研究的熱點(diǎn)之一,所以對(duì)血管周細(xì)胞的生物學(xué)特征、標(biāo)記物、細(xì)胞功能等的研究都為相關(guān)研究提供基礎(chǔ)資料。周細(xì)胞產(chǎn)生手指狀的外延以調(diào)控毛細(xì)血管的血流量。周細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之間共同擁有一個(gè)基膜,基膜上有多種細(xì)胞連接,包括多種整合素、神經(jīng)鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細(xì)血管直徑的雙向調(diào)控;毛細(xì)血管受損時(shí),周細(xì)胞還可增殖,分化為內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的人血管周細(xì)胞采用膠原酶-中性蛋白酶聯(lián)合消化法及不銹鋼網(wǎng)篩過(guò)濾法結(jié)合密度梯度離心法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的人微血管周細(xì)胞經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號(hào)CM-H169

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO25%

 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠 EGFR 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽

小鼠 EGFR 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

小鼠 EGFR 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽

小鼠 EGFR 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽

小鼠 EGFR 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

小鼠TGF-beta 3 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

小鼠LCN2 / NGAL 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

 SOCS3 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽

 PRDX2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽

 SCARB2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

微血管周細(xì)胞2-溴苯肼鹽酸鹽 98%200PSS棕色玻璃瓶,大口,200ML,用于盛放固體,φ62*120SM-MHC(Cardiac myosin heavy chain)  心肌肌凝蛋白多肽

3-溴苯肼鹽酸鹽 98%棕色玻璃瓶,大口,60ML,用于盛放固體,φ44.8*75Alpha-Synuclein  核突觸蛋白(抗原)

4-溴苯肼單鹽酸鹽 99%棕色玻璃瓶,小口,120ml,用于乘裝液體,φ48.6*112.6Alpha-Synuclein  核突觸蛋白(抗原)

2-氯苯肼鹽酸鹽 97%30ZSS棕色玻璃瓶,30ML,用于盛裝液體,φ33.2*79CA15-3 peptide  癌相關(guān)抗原抗原

4-氯苯肼鹽酸鹽 97%500MLZPA棕色玻璃瓶,500ML,用于乘放液體,φ75.6*183Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1)  P物質(zhì)受體(抗原)

3-氯苯肼鹽酸鹽 98%L-異酯鹽酸鹽 99%p-Caldesmon(phosphor-Ser789)  化鈣介質(zhì)素抗原

3,4-二肼鹽酸鹽 97%三氟甲磺酸鋇 98%NK-2R peptide  神經(jīng)激肽A受體(多肽抗原)

2-氟苯肼鹽酸鹽 97%Boc-烯基甘 二環(huán)己基銨鹽  98%Calpain 1  鈣蛋白(多肽)x

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