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詳細介紹
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 表皮黑色素細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1029 |
商品介紹：
名稱 表皮黑色素細胞 2.組織來源：皮膚組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 人表皮黑色素細胞分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層，由胚胎時期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結構，由復層扁平上皮構成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。黑色素細胞是皮膚產(chǎn)生和維持色素的主要細胞，起源于神經(jīng)嵴，后逐漸遷移到表皮和毛囊。黑色素細胞的異?；蚬δ艿氖Се铝艘幌盗须y治性色素性疾病的發(fā)生，如、黃褐斑等。表皮黑色素細胞主要分布于位于表皮的基底層，與表皮細胞共同組成表皮黑素單位，其主要功能是產(chǎn)生黑素小體保護皮膚免受損害。 5.方法簡介： 實驗室分離的人表皮黑色素細胞先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-膠原酶混合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的人表皮黑色素細胞經(jīng)S-100免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H108 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)梭形、多角形 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 CD247 基因全長ORF克隆
大鼠 SLC4A1 基因全長ORF克隆
大鼠 TLR4 基因全長ORF克隆
大鼠 FZD9 基因全長ORF克隆
大鼠 ENPEP 基因全長ORF克隆
大鼠 TLR9 基因全長ORF克隆
大鼠 IL1A 基因全長ORF克隆
大鼠 ART1 基因全長ORF克隆
大鼠 ICOS 基因全長ORF克隆
大鼠 CD276 基因全長ORF克隆
表皮黑色素細胞0.78-50 ng/mL 人凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL 人活性氧調(diào)制因子1 (ROS modulator 1)ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL 脂氧素B4(Lipoxin B4)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL 蠶微粒子病(NB)核酸檢測試劑盒
0.156-10 ng/mL 人源性激肽釋放結合蛋白 ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL 戊糖素(Pentosidine)ELISA試劑盒
劉榮標氏鞭毛染色液 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：5ml*8
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Lymphotoxin-alpha
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Cathepsin L2
0.625-40 ng/mL 人磷脂A2受體（PLA2R）ELISA試劑盒
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