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冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-02-20 08:08:41瀏覽次數(shù):236

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) GOY-01X0983 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)*:細(xì)胞CDK1/CYCLIN B激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 20次
組織CDK1/CYCLIN B激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 20次
細(xì)胞CDK2/CYCLIN A激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 20次
組織CDK2/CYCLIN A激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 20次
細(xì)胞CDK2/CYCLIN E激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)

詳細(xì)介紹

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0983

商品介紹:

名稱    冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞   

2.組織來(lái)源:冠狀動(dòng)脈

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自冠狀動(dòng)脈組織;冠狀動(dòng)脈是供給心臟血液的動(dòng)脈,起于主動(dòng)脈根部,分左右兩支,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,將冠狀動(dòng)脈的分布分為三型:右優(yōu)勢(shì)型、均衡型、左優(yōu)勢(shì)型。左右冠狀動(dòng)脈是升主動(dòng)脈的第一對(duì)分支。左冠狀動(dòng)脈為一短干,發(fā)自左主動(dòng)脈竇,經(jīng)肺動(dòng)脈起始部和左心耳之間,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動(dòng)脈的后室間支相吻合。冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層扁平分布,是一薄層的專門上皮細(xì)胞,它形成冠狀動(dòng)脈的內(nèi)壁,是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個(gè)循環(huán)系統(tǒng),由心臟直至最小的微血管。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞采用混合酶短暫消化后組織貼塊、結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號(hào)CM-H087

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性可傳2-3

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO2,5%

 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大鼠 TAGLN 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 CTSB 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 KLK13 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 TCP1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 LOC683897 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 UGP2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 MTCH2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 MTHFD2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 IMPDH2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 MRPS22 / LOC683519 基因全長(zhǎng)ORF克隆

冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞7.8-500 ng/mL ELISA Kit for Human Membrane primary amine oxidase

0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Hemopexin

抗生素檢定培養(yǎng)基9號(hào) 英文名稱:Antibiotic Agar NO.9 產(chǎn)品規(guī)格:250g

62.5-4000 nmol/L ELISA Kit for Human Alpha-1B-glycoprotein

GN增菌液 英文名稱:GN Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格:9ml*20支/包

0.156-10 ng/mL 人γ-分泌(γ-secretase/GACE)ELISA試劑盒

0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human 60S ribosomal protein L13

胰蛋白胨大豆瓊脂 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:5kg/袋

78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Phospholipase A2, membrane associated

0.312-20 ng/mL 人性別決定區(qū)Y框蛋白9(SOX9)ELISA試劑盒

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