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詳細介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品屬性：
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠三叉神經(jīng)元細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1409 |
商品介紹：
名稱 大鼠三叉神經(jīng)元細胞 2.組織來源：三叉神經(jīng)組織 3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠三叉神經(jīng)元細胞分離自三叉神經(jīng)組織；三叉神經(jīng)為最粗大的混合性腦神經(jīng)，含一般軀體感覺和特殊內臟運動兩種纖維。其特殊內臟運動纖維起于腦橋中段的三叉神經(jīng)運動核，纖維組成三叉神經(jīng)運動根，由腦橋基底部與腦橋臂交界處出腦，位于感覺根下內側，最后進入三叉神經(jīng)第3支下頜神經(jīng)中，經(jīng)卵圓孔出顱，隨下頜神經(jīng)分支分布于咀嚼肌等。運動根內還含有三叉神經(jīng)中腦核有關的纖維，主要傳導咀嚼肌的本體感覺。三叉神經(jīng)內以軀體感覺神經(jīng)纖維為主，這些纖維的細胞體位于三叉神經(jīng)節(jié)（半月節(jié)）內，該神經(jīng)節(jié)位于顱中窩顴骨巖部的前面三叉神經(jīng)壓跡處，為硬腦膜形成的美克爾腔包裹。三叉神經(jīng)節(jié)由假單極神經(jīng)元組成，其中樞突集中構成了粗大的三叉神經(jīng)感覺根，由腦橋基底部與腦橋臂交界處入腦，止于三叉神經(jīng)諸感覺核，其中傳導痛溫覺的纖維主要終止于三叉神經(jīng)脊束核；傳導觸覺的纖維主要終止于三叉神經(jīng)腦橋核。三叉神經(jīng)節(jié)細胞的周圍突組成三叉神經(jīng)三大分支，即第1支眼神經(jīng)、第2支上頜神經(jīng)、第3支為下頜神經(jīng)。從3大分支不斷分支分布于面部皮膚、眼及眶內、口腔、鼻腔、鼻旁竇的粘膜、牙、腦膜等，傳導痛、溫、觸等多種感覺。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠三叉神經(jīng)元細胞采用胰蛋白酶消化法結合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的大鼠三叉神經(jīng)元細胞經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R314 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)神經(jīng)元細胞樣 傳代特性屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IFNA13 / Interferon alpha-13 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IFNA4 / Interferon alpha-4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
乙型流感 (B/Brisbane/60/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IL1R1 / CD121a 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H3N2 (A/Babol/36/2005) 神經(jīng) (Neuraminidase/NA) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 OSMR / IL-31RB 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ULBP2 / N2DL-2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠三叉神經(jīng)元細胞聯(lián)氨 CP,98.0%氯化 分析標準品，99.98%M30(Mouse Embryonic Stem MESPU30) ELISA Kit 小鼠胚胎干系MESPU30
聯(lián)氨 99.99% metals basis氯化 分析標準品，K（99.97%）/Cl（100.00%）NF-κB p65(Mouse nuclear factor-κB p65) ELISA Kit 小鼠核因子κB亞基p65親和肽
鹽酸 ACS, 37% fuming, Hg ≤0.0000005%, ≥37% (T)重鉻酸 分析標準品，99.998%GP- II b III a/CD41+CD61(Mouse plaet membrane glycoprotein II b III a) ELISA Kit 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa
鹽酸 GR,36-38%重鉻酸標準溶液0.1mol/LFFA(Mouse free fatty acids) ELISA Kit 小鼠游離脂肪酸
鹽酸 用于痕量分析, ≥37% (T)鄰苯二甲酸氫 核磁共振定量標準，99.998%TSP-1(Mouse thrombospondin 1) ELISA Kit 小鼠血小板反應蛋白/敏感蛋白1
鹽酸 ACS, 37%高錳酸標準溶液1/5KMnO4：0.1011mol/LON(Mouse osteonectin) ELISA Kit 小鼠骨粘連蛋白
鹽酸 電子級,37%標準溶液 1.00mg/mL，基體：甲（劇品）FA(Mouse Folic acid) ELISA Kit 小鼠
鹽酸標準溶液 1.000mol/L(1N)環(huán)唑標準溶液 1.00mg/mlhiston-H2b(Mouse histon-H2b) ELISA Kit 小鼠組蛋白H2bx
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