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小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞

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更新時間:2025-02-20 12:30:54瀏覽次數(shù):240

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X1048 應用領域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞的相關(guān)*:細鎂ATP(Mg++ -ATPase)活性比色法定量 20次
檢測試劑盒
酵母鎂ATP(Mg++ -ATPase)活性比色法定量 20次
檢測試劑盒
植物鎂ATP(Mg++ -ATPase)活性比色法定量 20次
檢測試劑盒

詳細介紹

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

公司細胞現(xiàn)貨供應,質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱

小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X1048

產(chǎn)品介紹:

名稱    小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞

2.組織來源:視網(wǎng)膜組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。第一神經(jīng)元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上,而視錐細胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節(jié)細胞,約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系,負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層,專管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結(jié)構(gòu),它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視神經(jīng)到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力*。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細胞,它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,在視網(wǎng)膜血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義。由于從不同的組織和器官獲得的內(nèi)皮細胞具有不同的特性,在腦和視網(wǎng)膜中,這些內(nèi)皮細胞具有內(nèi)屏障的功能,在調(diào)節(jié)血管生理狀態(tài),釋放血管活性物質(zhì)以及新生血管的形成中發(fā)揮著重要作用,體外分離培養(yǎng)RCEC對研究視網(wǎng)膜血管性疾病發(fā)生發(fā)展的病理生理機制以及疾病的早期防治具有重要臨床意義。

5.方法簡介:

實驗室分離的小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、最后通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-M114

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)內(nèi)皮細胞樣

傳代特性可傳2-3

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO2,5%

細胞特點及處理:

產(chǎn)品特點:

1、 使用方便:不需昂貴設備。

2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。

3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。

4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。

5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。

6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。

7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。

8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。

細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

QQ截圖20210907103850.png

 

細胞培養(yǎng)技巧:

一、凍存時的注意事項:

1. 在冷凍保存之前,應觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %最佳

2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質(zhì),例如是否有雜細胞或者支原體等。

3. 使用的DMSO 應為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應為試劑級等級,以高壓蒸汽

滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。

4. 冷凍保存的細胞濃度:

4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml

4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。

4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。

4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。

5. 冷凍保護劑濃度為5 %10 DMSO,若是不確定細胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應作一個backup culture,以防止冷凍失敗。

 

下列是公司正銷售的產(chǎn)品:

大鼠 IFNAR1 基因全長ORF克隆

大鼠 IL11RA 基因全長ORF克隆

大鼠 LTBR 基因全長ORF克隆

大鼠 CD40 基因全長ORF克隆

大鼠 TNFRSF9 基因全長ORF克隆

大鼠 TNFSF14 基因全長ORF克隆

大鼠 IFNA1 基因全長ORF克隆

大鼠 IFNA4 基因全長ORF克隆

大鼠 IFNB1 基因全長ORF克隆

大鼠 TNFRSF13C 基因全長ORF克隆

小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞酪蛋白胨 英文名稱:Peptone from Casein 產(chǎn)品規(guī)格:250g

0.078-5 ng/mL ELISA Kit for Human DNA replication licensing factor MCM2

MR-VP 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Fascin

0.156-10 ng/mL 人泛素關(guān)聯(lián)蛋白2(UBAP2)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Nucleolar and spindle-associated protein 1

MFC肉湯 英文名稱:MFC Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g

1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human High-density lipoprotein

鹽瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱:MannitolSalt Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Basal cell adhesion molecule

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