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大鼠心臟干細(xì)胞

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更新時間:2025-02-20 12:46:02瀏覽次數(shù):241

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X1251 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
大鼠心臟干細(xì)胞的相關(guān)*:定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒
細(xì)胞HHV6-A(HUMAN HERPESVIRUS 6-A)病毒 20次
定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒
組織HHV6-A(HUMAN HERPESVIRUS 6-A)病毒 20次
定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒
體液HHV6-A(HUMAN HERPESVIRUS 6-A)病毒 20次

詳細(xì)介紹

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產(chǎn)品屬性:  

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

大鼠心臟干細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1251

商品介紹:

名稱    大鼠心臟干細(xì)胞  

2.組織來源:心臟組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介:

大鼠心臟干細(xì)胞分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中最重要的一個器官,主要功能是為血液流動提供壓力,把血液運(yùn)行至身體各個部分。心臟由心肌構(gòu)成,左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,向器官、組織提供充足的血流量,以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì),并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無機(jī)鹽、尿素和尿酸等),使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。研究發(fā)現(xiàn),心臟干細(xì)胞是一種多潛能細(xì)胞,具有再生和克隆能力,并可分化為心肌細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞。體內(nèi)研究顯示,從心臟中分離出的心臟干細(xì)胞,經(jīng)體外簡單培養(yǎng)、增殖和標(biāo)記后,移植到心肌梗死邊緣區(qū)域,心梗血流動力學(xué)和心室壁厚度較對照組明顯改善,心肌梗死邊緣區(qū)域發(fā)現(xiàn)有標(biāo)記的心肌細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。盡管其新生心肌細(xì)胞較小,但表達(dá)一些特殊肌蛋白如心臟肌球蛋白重鏈、α-肌動蛋白、α-輔肌動蛋白、連接蛋白等,證實了心臟干細(xì)胞對心肌梗死的修復(fù)作用。干細(xì)胞移植治療是目前心肌梗死和缺血性心臟病細(xì)胞重建的主要方法,成體干細(xì)胞中的c-kit陽性心臟干細(xì)胞因其來源于心臟,有定向心臟細(xì)胞系分化的趨勢,體內(nèi)外可以分化成心肌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞,同時自體移植不存在免疫排斥反應(yīng)及倫理問題已經(jīng)成為目前研究的熱點。短期內(nèi)獲得治療量的自體心臟干細(xì)胞是這一治療應(yīng)用于臨床的關(guān)鍵所在。因此,研究一種新的分離培養(yǎng)方法可在短時期內(nèi)獲得大量純度較高的自體c-kit陽性心臟干細(xì)胞成為目前干細(xì)胞領(lǐng)域研究的熱點問題之一。

5.方法簡介:

實驗室分離的大鼠心臟干細(xì)胞采用機(jī)械剪碎組織、膠原酶分次消化法結(jié)合差速貼壁、心臟干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的大鼠心臟干細(xì)胞經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件PLL0.1mg/ml

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-R189

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)長梭形

傳代特性可傳3代左右

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 CD16a / FCGR3A CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 IgG1 Fc CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 CD16a / FCGR3A CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 / 恒河猴 / 狗 TGF-beta 1 / TGFB1 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 IL13 / ALRH CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 β-NGF / Beta-NGF CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 Thrombopoietin / THPO / TPO CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 IL6ST / CD130 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠心臟干細(xì)胞環(huán)指蛋白215抗體Anti-DRD2 Antibody綠膿假單胞(綠膿桿)多少錢

環(huán)指蛋白187抗體Anti-DRD5 Antibody白色葡萄球說明書

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