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大鼠胰島細胞

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更新時間:2025-02-20 13:08:31瀏覽次數(shù):245

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0747 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
大鼠胰島細胞的相關(guān)*:體液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(NAG)活性比色法定量檢測試劑盒 20次
通用型鉀離子(K)濃度化學比色法定量檢測試劑盒 50次
細胞鉀離子(K)濃度化學比色法定量檢測試劑盒 20次
組織鉀離子(K)濃度化學比色法定量檢測試劑盒 20次
血液鉀離子(K)濃度化學比色法定量檢測試劑盒 20次
體液鉀離子(K)濃度化學比色法定量檢測試劑盒 20次

詳細介紹

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

大鼠胰島細胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0747

商品介紹:

名稱    大鼠胰島細胞   

2.組織來源:胰腺組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

大鼠胰島細胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分泌生,以旁分泌的方式抑制αβ細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰島細胞作為糖尿病新藥的細胞篩選模型需保持其結(jié)構(gòu)完整、生理功能穩(wěn)定和足夠長的存活時間。胰島占胰腺總質(zhì)量的1%-2%,每個胰島大概含有1000個細胞。胰島移植可消除常規(guī)治療產(chǎn)生的嚴重低血糖癥狀,具有創(chuàng)傷小及并發(fā)癥少等優(yōu)點,是最有前景的型糖尿病治療方案。移植胰島的獲得需經(jīng)過供體篩選、胰腺消化、胰島分離純化及結(jié)果鑒定等步驟,分離純化效果取決于原料及操作方法的選擇。

5.方法簡介:

實驗室分離的大鼠胰島細胞采用膠原酶灌注消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的大鼠胰島細胞經(jīng)DTZ染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-R015

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)梭形、多角形

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 JAM-B 基因全長ORF克隆

 CCL26 基因全長ORF克隆

 GPC1 基因全長ORF克隆

 KLRK1 / CD314 / NKG2D 基因全長ORF克隆

 FCN2 / Ficolin-2 轉(zhuǎn)錄變體SV0 基因全長ORF克隆

 FGF10 基因全長ORF克隆

 PDGF-B 基因全長ORF克隆

 PTPN2 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆

 TGFBI 基因全長ORF克隆

 TCN2 基因全長ORF克隆

大鼠胰島細胞CIN-1添加劑 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:1ml*5

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Semaphorin-3A

0.78-50 ng/mL 人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白2(LRP2)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Olfactory receptor 51E2

0.625-40 ng/mL 人Gremlin 1(GREM1)ELISA試劑盒

31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Homeobox protein engrailed-2

0.78-50 ng/mL 人角化細胞富含蛋白(KPRP)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Kallikrein-2

0.312-20 ng/mL 空腸彎曲菌(CJ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

15.6-1000 pg/mL 人存活素(Surv)ELISA試劑盒

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