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小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-02-21 11:15:21瀏覽次數(shù):284

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) GOY-01X1021 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞的相關(guān)*:細(xì)胞PDGFRβ激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 20次
組織PDGFRβ激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 20次
細(xì)胞PYK2激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 20次
組織PYK2激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 20次
細(xì)胞RCT激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 20次
組織RCT激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 20次

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產(chǎn)品屬性:  

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

貨號(hào)

小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1021

商品介紹:

名稱(chēng)    小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞  

2.組織來(lái)源:腦靜脈組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞分離自腦靜脈組織;與腦動(dòng)脈相比,腦靜脈管壁較薄。與身體其他部位的靜脈不同,腦靜脈管壁中沒(méi)有靜脈瓣,靜脈血的回流依賴(lài)高位的勢(shì)能。腦靜脈血的回流路徑可以歸納為:大部腦靜脈血經(jīng)腦深部靜脈和腦血竇流入頸內(nèi)靜脈;小部腦靜脈血經(jīng)眼部翼狀靜脈叢,進(jìn)入靜脈導(dǎo)血管再到頭皮,最后流入椎管中的椎旁靜脈系統(tǒng)。腦靜脈系統(tǒng)有大量交通枝靜脈叢,即使兩側(cè)頸內(nèi)靜脈都被阻塞,大腦靜脈血仍可經(jīng)椎靜脈和頸外靜脈系統(tǒng)完成其回流。腦靜脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腦靜脈平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號(hào)CM-M103

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳3代左右

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

食蟹猴 LTBR 基因全長(zhǎng)ORF克隆

食蟹猴 TNFRSF10D / TRAILR4 基因全長(zhǎng)ORF克隆

食蟹猴 TNFRSF1A 基因全長(zhǎng)ORF克隆

食蟹猴 TNFSF10 基因全長(zhǎng)ORF克隆

食蟹猴 CD40 基因全長(zhǎng)ORF克隆

食蟹猴 CD40LG 基因全長(zhǎng)ORF克隆

食蟹猴 TNFSF13 基因全長(zhǎng)ORF克隆

食蟹猴 TNFSF12 基因全長(zhǎng)ORF克隆

食蟹猴 FGF14 基因全長(zhǎng)ORF克隆

食蟹猴 LTB 基因全長(zhǎng)ORF克隆

小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞15.62-1000 pg/mL 人轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白β鏈3(GNB3)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Transcobalamin-2

Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基管 英文名稱(chēng):Cary-Blair Transport Medium 產(chǎn)品規(guī)格:20支/包

0.312-20 ng/mL 加壓素(AVP)ELISA試劑盒

0.39-25 ng/mL 人前列腺跨膜上皮抗原1(STEAP1)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mL 人磷脂?;级嗑厶翘禺愋粤字珼 (PI-G PLD) ELISA試劑盒

BSSA培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):BSSA Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

阪崎腸桿菌分離瓊脂(ESIATM) 英文名稱(chēng):Enterobacter Sakazakii Isolation Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g

31.2-2000 pg/mL 人(Cyt-C)ELISA試劑盒

15.6-1000 U/mL 人粒細(xì)胞過(guò)氧化物(EPO)ELISA試劑盒

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