詳細介紹
儀器 | 試劑 | 耗材 |
離心機 | 胎牛血清(FBS) | 離心管(15ml、50ml) |
生物安全柜 | 無菌 1×PBS pH=7.2 | T-25 細胞培養(yǎng)瓶 |
電動移液器 | 0.25%+0.02%EDTA | 一次性無菌移液管(2ml、5ml、10ml) |
CO2 培養(yǎng)箱 | 培養(yǎng)基(含血清) | 1.8mL 凍存管 |
倒置顯微鏡 | 凍存液:90%FBS+10%DMSO | 程序降溫盒 |
22RV1 細胞專用培養(yǎng)基
產(chǎn)品分類 | 細胞系專用培養(yǎng)基 |
規(guī)格 | 1*125ml/500ml |
貨號 | GOY-XP4309 |
英文名稱 | 22RV1 |
產(chǎn)品介紹
22RV1細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持22RVl細胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含22RVl細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于22RVl 細胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分
RPMI-1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 435 mL
特級胎牛血清 50 mL
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
注意事項
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,如有接觸,立即用自來水沖洗即可。
復(fù)蘇
1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃;
2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱;
3) 戴上護目鏡,厚毛線手套后,從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細胞,盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中
復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率;
4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,混勻后,1000rpm 離心 5min;
5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,寫上細胞名稱、日期,再加入 4ml 培養(yǎng)基;
6) 離心完成后棄去上清,用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中,混勻后轉(zhuǎn)入
CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。
傳代 (細胞傳代建議一傳二)
1) 當(dāng)細胞匯合度達到 85%以上時,可進行傳代。
2) 在生物安全柜內(nèi),打開培養(yǎng)瓶瓶口,收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基;
3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,水平放置培養(yǎng)瓶,使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,吸棄 PBS;
4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min;
5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起,若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,將懸液吸入 15ml 離心管;
① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管,加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基;
② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和(避免吹打③);向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,輕拍培養(yǎng)瓶,95%左右細胞脫。
6) 1000rpm 離心 5min;
7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,各加入 4ml培養(yǎng)基。
8) 離心完成后,棄上清,用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,每個培養(yǎng)瓶各 1ml;
9) 水平放置培養(yǎng)瓶,震蕩混勻后,將培養(yǎng)瓶置于 37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
凍存 (細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支)
1)~6)參照傳代步驟
7)離心完成后,棄上清,用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中;
8)將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫;
9)第二天,取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。
?無菌操作?:細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服、鞋套,戴口罩、手套。
?器材滅菌?:玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。
?試劑選擇?:所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染,使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,應(yīng)按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。
?培養(yǎng)條件?:多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,定期檢查氣體濃度與流量,細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。
?日常觀察?:每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。
?定期檢測?:定期對細胞進行支原體、細菌、真菌等污染檢測。
植物血凝素/凝集素(PHA)試劑盒
Human ai calpastatin aibody (ACAST-D IV) ELISA Kit 人抗鈣蛋白酶抑素抗體(ACAST-DⅣ)試劑盒
PorcineImmunoglobulinM,IgMELISAKit 豬免疫球蛋白M(IgM)試劑盒分裝
CLIAKitforAFP-L3(Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin3)ELISAKit人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3
血液A高效液相色譜法定量試劑盒20次
MouseThyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit小鼠促甲狀腺素(TSH)試劑盒
山羊白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒
Rat apolipoprotein A1 (apo-A1) ELISA Kit 大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒
HumanGlathioneperoxidase,GSH-PxELISAKit 人過氧化酶(GSH-Px)試劑盒分裝
Humanheatshockprotein27,HSP-27試劑盒人熱休克蛋白27(HSP-27)試劑盒
組織輔酶Q含量比色法定量試劑盒20次
Humanmaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)試劑盒
植物類黃測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
植物總酚測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
植物原測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
尿酸含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子6抗體
酶2、3抗體
CD59重組大鼠 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白 Protein
FRA1/FOSL1 peptide FRA-1多肽蛋白 1mgFRA1/FOSL1 peptide FRA-1多肽蛋白
EPOR & CD131重組人 EPOR & CD131 Homodimer 蛋白 Protein
ADIPOQ Protein Human 重組人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白
JAM2 Protein Mouse 重組小鼠 JAM-2 / JAM-B 蛋白
22RV1 細胞專用培養(yǎng)基FRA1/FOSL1 peptide FRA-1多肽蛋白 1mgFRA1/FOSL1 peptide FRA-1多肽蛋白
ADIPOQ Protein Human 重組人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白
CD59重組大鼠 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白 Protein
JAM2 Protein Mouse 重組小鼠 JAM-2 / JAM-B 蛋白
EPOR & CD131重組人 EPOR & CD131 Homodimer 蛋白 Protein