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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2025-02-21 20:32:45瀏覽次數(shù)：242
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0925 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠前列腺上皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0925 |
商品介紹：
名稱 大鼠前列腺上皮細(xì)胞 2.組織來源：前列腺 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 大鼠前列腺上皮細(xì)胞分離自前列腺組織；前列腺（Prostate）是雄性*的性腺器官；前列腺是不成對(duì)的實(shí)質(zhì)性器宮，由腺組織和肌組織構(gòu)成。前列腺如栗子，底朝上，與膀胱相貼，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯(lián)合，后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過，扼守著尿道上口，所以，前列腺有問題時(shí)，排尿首先受影響。前列腺是機(jī)體非常少有的，具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是構(gòu)成精液主要成分；作為內(nèi)分泌腺，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。前列腺上皮細(xì)胞與前列腺的功能關(guān)系密切，上皮細(xì)胞的損傷是前列腺炎的主要病癥，重度的前列腺炎患者的前列腺液內(nèi)可檢測(cè)到脫落的上皮細(xì)胞，這是上皮細(xì)胞損傷的標(biāo)志。炎癥發(fā)生時(shí)，與炎癥相關(guān)的一些炎癥因子可能發(fā)生變化。因此，體外培養(yǎng)前列腺上皮細(xì)胞是研究前列腺炎及前列腺上皮肉瘤等疾病的前提和基礎(chǔ)。前列腺主要特征如下：①前列腺結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)均受雄性激素的調(diào)控；②基底細(xì)胞主要表達(dá)高分子量細(xì)胞角蛋白（CK-5、CK-14），基底上皮細(xì)胞可分化成管腔上皮細(xì)胞；③前列腺上皮細(xì)胞的培養(yǎng)為研究前列腺的許多重要特性以及化學(xué)和激素性致癌作用提供了機(jī)會(huì)。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠前列腺上皮細(xì)胞采用先中性蛋白酶消化、后膠原酶-胰蛋白酶聯(lián)合消化并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠前列腺上皮細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R064 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
甲型流感 H12N5 (green-winged teal/ALB/199/1991) 神經(jīng) (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆
甲型流感 H5N3 (duck/Hokkaido/167/2007) 神經(jīng) (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆
甲型流感 H4N6 (mallard/Ohio/657/2002) 神經(jīng) (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆
甲型流感 H4N4 (mallard duck/Alberta/299/1977) 神經(jīng) (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆
甲型流感 H3N8 (canine/New York/145353/2008) 神經(jīng) (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆
甲型流感 H9N2 (Chicken/Hong Kong/G9/1997) 神經(jīng) (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆
甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體)
甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) NS1 基因全長ORF克隆
類缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, CRF07_BC) GP120 基因全長ORF克隆
類呼吸道合胞病毒 hRSV (subtype A, strain A2) Fusion glycoprotein / RSV-F 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化) (表達(dá)載體)
大鼠前列腺上皮細(xì)胞玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基顆粒 英文名稱：Rose Bengal Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：300ml/袋*10
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Proenkephalin-B
3.12-200 U/L 人轉(zhuǎn)氨/谷丙轉(zhuǎn)氨(ALT/GPT)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Complement factor D
0.312-20 ng/mL 人Nesfatin1蛋白(Nesfatin-1)ELISA試劑盒
酵母粉葡萄糖氯瓊脂（YDC） 英文名稱：Yeast Extract Dextrose Chloramphenicol Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Tartrate-resistant acid phosphatase type 5
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Glypican-2
2×YT肉湯 英文名稱：2×YT Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.312-20 ng/mL 人血管生成素相關(guān)蛋白7(Angiopoietin-related protein 7)ELISA試劑盒
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