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大鼠肌腱干細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-02-23 21:14:34瀏覽次數(shù):255

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X1185 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
大鼠肌腱干細(xì)胞的相關(guān)*:真格蘭-韋革氏(Gram-Weigert)染色試劑盒 50次
真天青曙紅(Azure-eosinate)染色試劑盒 50次
埃蒙氏(EMMONS)真培養(yǎng)基 100毫升
真/酵母細(xì)胞樣品細(xì)氧化活性測定試劑盒 20次
真/酵母細(xì)胞線粒體DNA萃取試劑盒 10/20次
真/酵母細(xì)胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒 20次

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性: 

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

大鼠肌腱干細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1185

商品介紹:

名稱    大鼠肌腱干細(xì)胞 

2.組織來源:肌腱組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介:

大鼠肌腱干細(xì)胞分離自肌腱組織;肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結(jié)締組織,便于肌肉附著和固定。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上,是由于肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動不同骨的運(yùn)動。每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分,肌腹由肌纖維構(gòu)成,色紅質(zhì)軟,有收縮能力,肌腱由致密結(jié)締組織構(gòu)成,色乳白較硬,沒有收縮能力。肌腱把骨骼肌附著于骨骼。長肌的肌腱多呈圓索狀,闊肌的肌腱闊而薄,呈膜狀,又叫腱膜。此處的肌腹即為通常所說的紅肌,而肌腱即為白肌,分別控制肌肉的力量、爆發(fā)力和耐力。肌腱干細(xì)胞(TSCs)是一種來源于肌腱組織的間充質(zhì)干細(xì)胞,其具有多向分化潛能,并且在外源性前列腺素E2作用下異常分化。體外培養(yǎng)時(shí)該細(xì)胞群具有克隆形成能力、自我更新及多向分化潛能等干細(xì)胞的普遍特性。肌腱干細(xì)胞可以被誘導(dǎo)向脂肪細(xì)胞、軟骨樣細(xì)胞、骨細(xì)胞分化;在裸鼠模型中,肌腱干細(xì)胞還可以形成肌腱樣組織,軟骨樣組織以及腱-骨連接樣組織等。相比骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞而言,TSCs具有更好的克隆形成能力和增殖能力,軟骨相關(guān)基因和肌腱相關(guān)基因表達(dá)更高,具有更好的成骨、成脂和成軟骨能力,因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肌腱干細(xì)胞采用膠原酶、中性蛋白酶混合消化法并通過肌腱干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肌腱干細(xì)胞經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-R165

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形

傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO2,5%

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠 IL6 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽

小鼠 IL6 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

小鼠 ALK-3 / BMPRIA 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

 TMPRSS2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

 IL12RB1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

 PRKD2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

 WHSC1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

 APP / PN2 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

 CFD 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

 CD309 / VEGFR2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽

大鼠肌腱干細(xì)胞Src原癌基因抗體Anti-FLT1(VEGFR1) Antibody無殼曲霉多少錢

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