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大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時間:2025-02-24 10:46:36瀏覽次數(shù):289

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0923 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)*:血液對氧磷1(PON1)內(nèi)酯活性比色法定量檢測試劑盒
細(xì)胞對氧磷2(PON2)活性比色法定量檢測試劑盒
組織對氧磷2(PON2)活性比色法定量檢測試劑盒
細(xì)胞對氧磷3(PON3)活性比色法定量檢測試劑盒
組織對氧磷3(PON3)活性比色法定量檢測試劑盒
細(xì)胞對氧磷3(PON3)活性熒光定量檢測試劑盒

詳細(xì)介紹

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0923

商品介紹:

名稱    大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞   

2.組織來源:腎組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介:

大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳酸氫鈉等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性素D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團(tuán)毛細(xì)血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動脈進(jìn)入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,而是流入出球小動脈。在腎小球內(nèi),微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進(jìn)行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,形成濾液,滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球內(nèi)皮細(xì)胞是一類特殊微血管類型的細(xì)胞。細(xì)胞為圓形、多角形,單層貼壁生長;細(xì)胞質(zhì)豐富,細(xì)胞核為圓形或卵圓形。腎小球內(nèi)皮細(xì)胞被覆于腎小球毛細(xì)血管壁腔側(cè),與血流直接接觸,是腎小球濾過膜的第一道屏障,可粘附細(xì)菌和白細(xì)胞,修復(fù)基底膜,并有抗凝、抗血栓的作用;所以,體外培養(yǎng)的腎小球內(nèi)皮細(xì)胞在免疫學(xué)和病理生理學(xué)領(lǐng)域中具有重要的研究價值。

5.方法簡介:

實驗室分離的大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞采用先機械研磨過不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小球、后用膠原酶消化,結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號CM-R063

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性可傳2-3

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO2,5%

 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

甲型流感 H5N1 (chicken/Yamaguchi/7/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)

甲型流感 H5N1 (Thailand/1(KAN-1)/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)

甲型流感 H5N1 (Thailand/1(KAN-1)/2004)神經(jīng) (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)

甲型流感 H1N1 (Beijing/22808/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)

甲型流感 H5N1 (Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)

甲型流感 H4N8 (chicken/Alabama/1/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)

甲型流感 H3N2 (Babol/36/2005)神經(jīng) (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)

乙型流感 (Brisbane/60/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)

甲型流感 H1N1 (New York/18/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)

甲型流感 H4N4 (mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)

大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞0.312-20 ng/mL 人C-X-C趨化因子受體5(CXC-R5)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mL 人增殖細(xì)胞核抗原相關(guān)因子(PCNA-associated factor)ELISA試劑盒

硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基 英文名稱:Silicate Bacteria Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Insulin-like growth factor-binding protein 1

78-5000 pg/mL 人70kDa熱休克蛋白6(HSPA6)ELISA試劑盒

測定培養(yǎng)基 英文名稱:Folic Acid Assay Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

6.25-400 pg/mL 人垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因2(PTTG2)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mL 人硫酸酯2(SULF2)ELISA試劑盒

0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Regulator of G-protein signaling 19

0.312-20 ng/mL 人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒

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