化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 兔羊膜胚胎細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0843 |
商品介紹：
名稱 兔羊膜胚胎細胞 2.組織來源：羊膜組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 兔胚胎羊膜細胞分離自羊膜組織；羊膜為單層上皮細胞互相連接構成的薄膜。單層上皮細胞具有分泌羊水的作用。隨著胚胎的生長發(fā)育，羊膜與絨毛密切緊貼，形成胎膜。胎膜隨著羊膜腔逐漸擴大而呈半透明的薄膜，無血管，富有韌性（胎膜也就是羊膜腔的囊壁）。羊膜腔內(nèi)充滿的液體為羊水。羊膜僅覆蓋在胎盤的兒體面，并不深入胎盤組織中，隨著妊娠的進展羊膜腔逐漸擴大，占據(jù)整個子宮腔，羊膜是胎膜最內(nèi)一層，是一層半透明的薄膜，與覆蓋在胎盤、臍帶的羊膜層相連接。羊膜是胎盤的最內(nèi)層，與人眼結膜組織結構相似，含有眼表上皮細胞，包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質(zhì)，其光滑，無血管、神經(jīng)及淋巴，具有一定的彈性，厚0.02~0.5mm，在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元，主要為i、iii、iv、v、vii型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份，正是這些成份使羊膜可以充當“移植的基底膜"而發(fā)揮一種新的健康合適的基質(zhì)。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質(zhì)細胞組成，均具有多分化潛能，可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元，且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營養(yǎng)因子的功能。 5.方法簡介： 實驗室分離的兔羊膜胚胎細胞采用胰-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的兔羊膜胚胎細胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-Rb040 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 傳代特性可傳3-5代左右 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 YWHAG 基因全長ORF克隆
小鼠 HCRTR2 基因全長ORF克隆
小鼠 YWHAB 基因全長ORF克隆
小鼠 GRK5 基因全長ORF克隆
小鼠 Smad1 基因全長ORF克隆
小鼠 MAP3K3 / MEKK3 基因全長ORF克隆
小鼠 MAPKAPK3 基因全長ORF克隆
小鼠 PDPK1 基因全長ORF克隆
小鼠 STK11 基因全長ORF克隆
小鼠 FASLG / FASL 基因全長ORF克隆
兔羊膜胚胎細胞0.078-5 ng/mL 人β防御素124(Beta-defensin 124)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL 人白介素16(IL-16)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL 人血小板衍生生長因子B(PDGF subunit B)ELISA試劑盒
1.56-100 ng/ml ELISA Kit for Human Dipeptidyl peptidase 1
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Gamma-Aminobutyric acid
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Beta-defensin 119
78-5000 pg/mL 人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human GDNF family receptor alpha-1
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Cytidine deaminase
JM培養(yǎng)基基礎 英文名稱：JM Medium Base 產(chǎn)品規(guī)格：250g
化工儀器網(wǎng)