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腎小球系膜細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-02-24 11:34:28瀏覽次數(shù):285

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0932 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
腎小球系膜細(xì)胞的相關(guān)*:細(xì)胞組織蛋白G(CATHEPSIN G)活性比色法定量檢測試劑盒 20次
組織樣品組織蛋白G(CATHEPSIN G)活性比色法定量檢測試劑盒 20次
細(xì)胞白細(xì)胞介素-1β轉(zhuǎn)換(ICE)活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒 20次
組織白細(xì)胞介素-1β轉(zhuǎn)換(ICE)活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒 20次
細(xì)胞血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化(ACE)總活性比色法定量檢測試劑盒 20次

詳細(xì)介紹

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱

腎小球系膜細(xì)胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X0932

產(chǎn)品介紹:

名稱    腎小球系膜細(xì)胞

2.組織來源:腎組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介:

腎小球系膜細(xì)胞分離自腎小球組織;腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團(tuán)毛細(xì)血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動脈進(jìn)入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,而是流入出球小動脈。在腎小球內(nèi),微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進(jìn)行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,形成濾液,滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球系膜是位于腎小球毛細(xì)血管袢之間的一種特殊間充質(zhì),由系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)組成。腎小球系膜細(xì)胞是腎小球內(nèi)非常活躍的細(xì)胞,具有分泌細(xì)胞基質(zhì)、產(chǎn)生細(xì)胞因子、吞噬和清除大分子物質(zhì)及類似平滑肌細(xì)胞收縮的功能。腎小球系膜細(xì)胞增生和基質(zhì)的過多產(chǎn)生是多種腎小球腎炎的主要病理表現(xiàn)。腎小球系膜細(xì)胞的培養(yǎng)是研究系膜擴(kuò)張、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法。系膜細(xì)胞的主要作用可能有:收縮作用,入球小動脈和出球動脈的收縮作用受系膜細(xì)胞的調(diào)節(jié),以影響毛細(xì)血管袢的內(nèi)壓和濾過率;支持作用,它填充于毛細(xì)血管袢之間,支持毛細(xì)血管的位置;吞噬作用,能吞噬被阻留在基膜內(nèi)的大分子物質(zhì)和蛋白質(zhì);分泌腎素,在腎缺血或免疫復(fù)合物沉積時(shí),系膜細(xì)胞增生且分泌腎素。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的人腎小球系膜細(xì)胞采用機(jī)械研磨法結(jié)合不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩過濾后使用膠原酶消化制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的人腎小球系膜細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件PLL0.1mg/ml

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號CM-H067

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳3代左右

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO2,5%

細(xì)胞特點(diǎn)及處理:

產(chǎn)品特點(diǎn):

1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。

2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。

3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。

4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。

5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。

6、 紫外檢測蛋白濃度時(shí),背景干擾低。

7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。

8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。

細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

QQ截圖20210907103850.png

 

細(xì)胞培養(yǎng)技巧:

一、凍存時(shí)的注意事項(xiàng):

1. 在冷凍保存之前,應(yīng)觀察細(xì)胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細(xì)胞密度為80 – 90 %最佳

2. 冷凍前檢測細(xì)胞是否保有其*性質(zhì),例如是否有雜細(xì)胞或者支原體等。

3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級等級,以高壓蒸汽

滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細(xì)胞會有毒性。

4. 冷凍保存的細(xì)胞濃度:

4-1. 正常的成纖維細(xì)胞: 1-3x 10^6 cells/ml

4-2 雜交瘤細(xì)胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細(xì)胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時(shí)后。

4-3.貼壁腫瘤細(xì)胞: 1 x 10^6,依細(xì)胞種類而異。腺癌類的細(xì)胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。

4-4. 懸浮細(xì)胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細(xì)胞須至少5 x 10^6 cells/ml。

5. 冷凍保護(hù)劑濃度為5 %10 DMSO,若是不確定細(xì)胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時(shí),亦應(yīng)作一個(gè)backup culture,以防止冷凍失敗。

 

下列是公司正銷售的產(chǎn)品:

大鼠 RBM47 基因全長ORF克隆

大鼠 NCAPH2 基因全長ORF克隆

大鼠 SPCS2 基因全長ORF克隆

大鼠 SLC25A13 基因全長ORF克隆

大鼠 HBA2 基因全長ORF克隆

大鼠 CDIP1 基因全長ORF克隆

大鼠 UMPS 基因全長ORF克隆

大鼠 CCNB1 基因全長ORF克隆

大鼠 FAM45A 基因全長ORF克隆

大鼠 RGD1306063 基因全長ORF克隆

腎小球系膜細(xì)胞0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Paired immunoglobulin-like type 2 receptor beta

0.156-10 ng/mL 禽傳染性支氣管炎病毒(AIBV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Gastrotropin

78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Bone morphogenetic protein 7

0.156-10 ng/mL 馬流感病毒H3N8型(EIV-H3N8)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

改良MS-H培養(yǎng)基 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:1000g

0.625-40 ng/mL 不對稱二甲基(Asymmetric dimethylarginine)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Caldesmon

0.312-20 nmol/mL ELISA Kit for Human Cyclin-dependent kinase inhibitor 2A, isoforms 1/2/3

3%NaCl 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支

使用方法:

收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3. 細(xì)胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

 

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