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小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) GOY-01X0998 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的相關(guān)*:細(xì)胞PIM1激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 20次
組織PIM1激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 20次
細(xì)胞PIM2激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 20次
組織PIM2激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 20次
細(xì)胞PKCα激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 20次
組織PKCα激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) 20次

詳細(xì)介紹

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱

小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號(hào)

GOY-01X0998

產(chǎn)品介紹:

名稱    小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞

2.組織來(lái)源:關(guān)節(jié)軟骨組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞分離自關(guān)節(jié)軟骨組織;關(guān)節(jié)軟骨屬于透明軟骨,表面光滑、呈淡藍(lán)色、有光澤,它是由一種特殊的叫做致密結(jié)締組織的膠原纖維構(gòu)成的基本框架,這種框架呈半環(huán)形,類似拱形球門,其底端緊緊附著在下面的骨質(zhì)上,上端朝向關(guān)節(jié)面,這種結(jié)構(gòu)使關(guān)節(jié)軟骨緊緊與骨結(jié)合起來(lái)而不會(huì)掉下來(lái),同時(shí)當(dāng)受到壓力時(shí)候,還可以有少許的變形,起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間,散在分布著軟骨細(xì)胞,軟骨細(xì)胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細(xì)胞組成,這些軟骨細(xì)胞維持關(guān)節(jié)軟骨的正常代謝。關(guān)節(jié)軟骨沒有神經(jīng)支配,也沒有血管,其營(yíng)養(yǎng)成分必須從關(guān)節(jié)液中取得,而其代謝廢物也必須排至關(guān)節(jié)液中,關(guān)節(jié)軟骨的這種營(yíng)養(yǎng)代謝必須通過關(guān)節(jié)運(yùn)動(dòng),使關(guān)節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行,所以關(guān)節(jié)運(yùn)動(dòng)對(duì)于維持關(guān)節(jié)軟骨的正常結(jié)構(gòu)起重要的作用。關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞位于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞位于關(guān)節(jié)軟骨組織的表層,單個(gè)分布、體積較小、呈橢圓形,長(zhǎng)軸與關(guān)節(jié)軟骨表面平行,越向深層的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形,細(xì)胞核圓形或卵圓形、染色淺,細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成群分布于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi),這些關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞由同一個(gè)母細(xì)胞分裂增殖而成,稱為同源細(xì)胞群。電鏡下,關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞有突起和皺褶,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中,關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞采用膠原酶聯(lián)合中性蛋白酶消化制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞經(jīng)型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號(hào)CM-M092

換液頻率每3-4天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形

傳代特性可傳2-3代左右

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

細(xì)胞特點(diǎn)及處理:

產(chǎn)品特點(diǎn):

1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。

2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。

3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。

4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。

5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。

6、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),背景干擾低。

7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。

8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。

細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

QQ截圖20210907103850.png

 

細(xì)胞培養(yǎng)技巧:

一、凍存時(shí)的注意事項(xiàng):

1. 在冷凍保存之前,應(yīng)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細(xì)胞密度為80 – 90 %最佳

2. 冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否保有其*性質(zhì),例如是否有雜細(xì)胞或者支原體等。

3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以高壓蒸汽

滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。

4. 冷凍保存的細(xì)胞濃度:

4-1. 正常的成纖維細(xì)胞: 1-3x 10^6 cells/ml

4-2 雜交瘤細(xì)胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細(xì)胞濃度不要太高,某些雜交瘤會(huì)因冷凍濃度太高而在解凍24 小時(shí)后。

4-3.貼壁腫瘤細(xì)胞: 1 x 10^6,依細(xì)胞種類而異。腺癌類的細(xì)胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml

4-4. 懸浮細(xì)胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細(xì)胞須至少5 x 10^6 cells/ml。

5. 冷凍保護(hù)劑濃度為5 %10 DMSO,若是不確定細(xì)胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時(shí),亦應(yīng)作一個(gè)backup culture,以防止冷凍失敗。

 

下列是公司正銷售的產(chǎn)品:

GDF15 基因全長(zhǎng)ORF克隆

ACVRL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

ACVR1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

TGFBR1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

FGF14 基因全長(zhǎng)ORF克隆

FGF9 基因全長(zhǎng)ORF克隆

FGF12 基因全長(zhǎng)ORF克隆

NOV 基因全長(zhǎng)ORF克隆

IGFBP5 基因全長(zhǎng)ORF克隆

IGF2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Extracellular matrix protein 1

瓊脂培養(yǎng)基K(XLD瓊脂) 英文名稱:Agar Medium K(Xylose,Lysine,Dexycholate Agar) 產(chǎn)品規(guī)格:250g

46.9-3000 pg/mL 人胰腺激素原ELISA試劑盒

賴脫羧培養(yǎng)基 英文名稱:Lysine-decarboxylase Test Broth 產(chǎn)品規(guī)格:5g

0.312-20 ng/mL 人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒

31.2-2000 pg/mL 人骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒

78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Tyrosine-protein kinase JAK3

78-5000 pg/mL 人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒

單料緩沖蛋白胨水管 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:10ml*20支

0.78-50 ng/mL 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒

使用方法:

收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3. 細(xì)胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

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