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小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-02-24 15:59:17瀏覽次數(shù):275

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) GOY-01X0841 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)*:細(xì)胞還原型甘肽(GSH)濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒 50次
血液還原型甘肽(GSH)濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒 50次
組織還原型甘肽(GSH)濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒 50次
體液還原型甘肽(GSH)濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒 50次
植物還原型甘肽(GSH)濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒 50次
細(xì)胞氧化型甘肽(GSSG)濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒 50次

詳細(xì)介紹

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

貨號(hào)

小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0841

商品介紹:

名稱(chēng)    小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞   

2.組織來(lái)源:肝臟組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝竇內(nèi)皮細(xì)胞(SEC)是肝臟內(nèi)所占比例最高的非實(shí)質(zhì)細(xì)胞,位于肝竇腔與肝細(xì)胞之間,具有物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于擁有一般細(xì)胞所沒(méi)有的窗孔結(jié)構(gòu)、細(xì)胞間連結(jié)松散、內(nèi)皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性,從而達(dá)到快速交換各種大小分子的目的。肝在遭到多種病原侵襲時(shí),肝竇內(nèi)皮細(xì)胞窗孔逐漸減少或消失,內(nèi)皮下基膜形成,產(chǎn)生類(lèi)似于連續(xù)型毛細(xì)血管的結(jié)構(gòu),這一過(guò)程稱(chēng)為肝竇毛細(xì)血管化。它由多種因素引起,其過(guò)程極復(fù)雜,在多種肝病的發(fā)病前期階段均有出現(xiàn),近年來(lái)受到廣泛關(guān)注。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞采用混合酶灌流消化、反復(fù)低速離心、密度梯度離心法,并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31CD14免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號(hào)CM-M040

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠 STYK1 / NOK 基因全長(zhǎng)ORF克隆

小鼠 CCR8 基因全長(zhǎng)ORF克隆

小鼠 PRPF4B 基因全長(zhǎng)ORF克隆

小鼠 NEK3 基因全長(zhǎng)ORF克隆

小鼠 TSPAN7 基因全長(zhǎng)ORF克隆

小鼠 PRNP 基因全長(zhǎng)ORF克隆

小鼠 MUC1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

小鼠 IFITM1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

小鼠 GGT1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

小鼠 PROCR 基因全長(zhǎng)ORF克隆

小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞78-5000 pg/mL 人線(xiàn)粒體腎型谷氨酰胺(GLS)ELISA試劑盒

包姜氏瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):Bordet-Gengou Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

TPY瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):TPY Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

0.156-10 ng/mL 人O6甲基DNA甲基轉(zhuǎn)移(MGMT)ELISA試劑盒

MUG快速鑒定大腸試劑 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:5ml*10支/盒

4.69-300 U/L ELISA Kit for Human Pancreatic triacylglycerol lipase

0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human C-telopeptide of Collagen alpha-1(I) chain

15.6-1000 pg/ml ELISA Kit for Human AT-rich interactive domain-containing protein 4B

12.5-800 U/mL ELISA Kit for Human Aryl hydrocarbon receptor

6.25-400 ng/mL 人K依賴(lài)蛋白S(VKDPs)ELISA試劑盒

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