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胰島β細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-02-24 16:42:53瀏覽次數(shù):421

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0765 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
胰島β細(xì)胞的相關(guān)*:超氧化物歧化(SOD)細(xì)胞裂解樣品制備試劑盒 ?50次
超氧化物歧化(SOD)組織裂解樣品制備試劑盒 ?50次
超氧化物歧化(SOD)紅細(xì)胞裂解樣品制備試劑盒 ?50次
超氧化物歧化(SOD)植物裂解樣品制備試劑盒 ?50次
胞漿超氧化物歧化(Cu/Zn SOD)分離試劑盒 50次
線粒體超氧化物歧化(Mn/Fe SOD)分離試劑盒 50次

詳細(xì)介紹

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

胰島β細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0765

商品介紹:

名稱    胰島β細(xì)胞   

2.組織來源:胰腺組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介:

人胰島β細(xì)胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氫鈉、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,胰島主要由4種細(xì)胞組成:α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細(xì)胞分泌胰島素,降低血糖;γ細(xì)胞分泌生長抑素,以旁分泌的方式抑制αβ細(xì)胞的分泌;PP細(xì)胞分泌胰多肽,抑制胃腸運(yùn)動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮。胰島β細(xì)胞,即胰島B細(xì)胞,是胰島細(xì)胞的一種,屬內(nèi)分泌細(xì)胞的一種,能分泌胰島素,與胰島α細(xì)胞分泌的胰高血糖素一起起到調(diào)節(jié)血糖的作用。胰島B細(xì)胞功能受損、胰島素分泌絕對或相對不足(胰島素抵抗),會(huì)使血糖升高,從而引發(fā)糖尿病。而胰島B細(xì)胞癌變會(huì)生成胰島素瘤,引起惡性血糖降低癥狀。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的人胰島β細(xì)胞采用先用膠原酶消化分離得到胰島、再用胰酶逐級消化胰島制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的人胰島β細(xì)胞經(jīng)Insulin含量檢測,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件PLL0.1mg/ml

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-H020

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO2,5%

 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 PD1 / PDCD1 基因全長ORF克隆

 ADORA3 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆

 AGTR1 / AT1 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆

 FCGR2A / CD32a 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆

 ADORA1 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆

 SHH / Sonic Hedgehog 基因全長ORF克隆

 ADORA2B / ADORA2 基因全長ORF克隆

 IL13 / ALRH 基因全長ORF克隆

 IL33 / NF-HEV 基因全長ORF克隆

 Integrin beta8 基因全長ORF克隆

胰島β細(xì)胞0.312-20 ng/mL 人基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL 人蛋白激Tec(Tyrosine-protein kinase Tec)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL 人同源異形盒蛋白NANOG(Homeobox protein NANOG)ELISA試劑盒

沙氏葡萄糖瓊脂(含氯) 英文名稱:Sabouraud-glucose Agar with Chloramphenicol 產(chǎn)品規(guī)格:250g

乳酸桿菌糖發(fā)酵培養(yǎng)基 英文名稱:Lactobacillus Carbohydrate Fermentation Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

12.5-800 U/mL ELISA Kit for Human Glutathione peroxidase 1

15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Interleukin-27 subunit alpha

支原體培養(yǎng)基 英文名稱:Mycoplasma Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

0.78-50 ng/mL 人雄激素受體(Androgen receptor) ELISA試劑盒

15.6-1000 pg/mL 人組織蛋白B(CTS-B)ELISA試劑盒

 


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