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HELF (胚肺成纖維細(xì)胞)

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更新時(shí)間:2025-02-26 11:42:53瀏覽次數(shù):581

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) GOY-01X0279 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
HELF (胚肺成纖維細(xì)胞)的相關(guān)*:真/酵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級(jí)綠色熒光測(cè)定試劑盒 50次
植物細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測(cè)定試劑盒 20次
植物細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級(jí)熒光測(cè)定試劑盒 50次
體液氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測(cè)定試劑盒 50次
體液氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級(jí)熒光測(cè)定試劑盒 50次
活體細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)原位染色

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性: 

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

HELF (胚肺成纖維細(xì)胞)

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0279

商品介紹:

名稱    HELF (胚肺成纖維細(xì)胞) 

生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

生長(zhǎng)培養(yǎng)基DMEM10% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大鼠脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

雞馬立克氏病病毒(MDV)抗體(IgM)免疫試劑盒*直銷

鞘磷脂(SM)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

山羊阿黑皮素原(POMC)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

兔子骨堿性(BALP)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

大鼠促甲狀腺素受體(TSHR)免疫試劑盒*直銷

豬腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

大鼠蛋白激G(PKG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

牛白介素17(IL-17)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

豚鼠白介素6(IL-6)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

HELF (胚肺成纖維細(xì)胞)1g 1,4- 雙 (5- 苯基 -2- 噁唑基 ) 苯 1,4-Bis(5-phenyl-2-oxazolyl)benzene 室溫保存

500mL Tris-HCl Buffer,2.0M,pH8.0  Tris-HCl Buffer,2.0M,pH8.0  常溫保存

5mL 酵母蛋白抑制劑 Protease Inhibitor for Yeast 4℃保存

2 ug pTWIN 1 pTWIN 1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

100次 凝固血液DNAout Blood Clot DNAOUT 常溫

2 ug pEFFP-C2 pEFFP-C2 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

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