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CT26.WT (小鼠結(jié)腸癌細胞)

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更新時間:2025-02-26 12:45:28瀏覽次數(shù):352

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0071 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
CT26.WT (小鼠結(jié)腸癌細胞)的相關(guān)*:Bosc23 包裝細胞克隆選擇培養(yǎng)基 500毫升
PA317包裝細胞克隆選擇培養(yǎng)基 500毫升
重組逆轉(zhuǎn)錄病毒穩(wěn)態(tài)表達細胞克隆凍存試劑盒 50次
重組腺病毒構(gòu)建試劑盒 1套
重組腺病毒包裝試劑盒 1套
通用腺病毒骨架載體(pAdEasy-1) 500納克
通用腺病毒穿梭載體 5微克
腺病毒GFP穿梭載體 5微克
腺病毒LacZ穿梭載

詳細介紹

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

CT26.WT (小鼠結(jié)腸癌細胞)

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0071

商品介紹:

名稱    CT26.WT (小鼠結(jié)腸癌細胞)   

別稱CT26WT

種屬小鼠

年齡(性別)不詳

組織來源器官:結(jié)腸;品系:BALB/c;疾?。喊?/span>

生長特性貼壁細胞

細胞形態(tài)成纖維細胞樣

背景描述CT26細胞是以N-亞硝基-N-甲基氨基甲酸酯(NNMU)誘導(dǎo)形成的未分化結(jié)腸癌細胞株,它克隆形成的細胞株命名為CT26.WT。用包含編碼典型腫瘤相關(guān)抗原(TAA)β-半乳糖苷酶(β-gal)lacZ基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CT26.WT細胞,得到致死的亞克隆CT26.CL25。即使CT26.CL25細胞表達了典型的TAA-β-半乳糖苷酶,在正常小鼠中CT26.CL25細胞和CT26.WT細胞的生長率與致死率也保持基本一致。CT26.WT細胞與CT26.CL25細胞一起可用作測試程序的模型,并用于研究宿主免疫反應(yīng)。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基RPMI-164010% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO25%

溫度:37℃

致瘤性Yes, in BALB/c mice. Mice inoculated, subcutaneously, developed lethal tumors at 80% frequency with 1×10^3 cells and at 100% with 1×10^4 cells. Pulmonary metastases developed when mice were inoculated, intravenously, with 1×10^4 cells.

抗原表達情況H-2d

 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

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CT26.WT (小鼠結(jié)腸癌細胞)2 ug pGEM Ex1 pGEM Ex1 低溫運輸,-20℃保存

抗生素檢定培養(yǎng)基6號(PH7.2-7.4)  500g

1瓶 EAC細胞株 EAC 低溫運輸和保存

225ml鹽緩沖液均質(zhì)袋 Phosphate Buffered Saline 10個/包

2000U T4 RNA 連接 2 (截短型 K227Q) T4 RNA Ligase 2(truncated K227Q) -20℃保存

250mL RIPA Buffer with EDTA & EGTA  RIPA Buffer with EDTA & EGTA  常溫保存

1mL 溶液,50mg/mL Dexamethasone DXM Solution -20℃避光保存

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