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AE-1 (小鼠雜交瘤細(xì)胞(抗AChE))

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更新時間:2025-02-26 13:02:52瀏覽次數(shù):325

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0467 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
AE-1 (小鼠雜交瘤細(xì)胞(抗AChE))的相關(guān)*:細(xì)胞GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)比色法定量檢測試劑盒 10/50 次
細(xì)胞GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒 10/50 次
GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 5次
GSK-3ALPHA蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 5次
GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒 25次
細(xì)胞GSK-3BETA蛋白

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性: 

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

AE-1 (小鼠雜交瘤細(xì)胞(抗AChE))

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0467

商品介紹:

名稱    AE-1 (小鼠雜交瘤細(xì)胞(AChE)) 

別稱AE1

種屬小鼠(B細(xì)胞),小鼠(骨髓瘤細(xì)胞)

年齡(性別)不詳

組織來源B淋巴細(xì)胞;淋巴瘤

生長特性懸浮細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)淋巴母細(xì)胞樣

背景描述用純化的人紅細(xì)胞乙酰膽堿脂酶免疫實驗動物,并將脾細(xì)胞與SP2/O-Agl4骨髓瘤細(xì)胞融合。產(chǎn)生的抗體與人及猴的乙酰膽堿脂酶結(jié)合,但AE-1細(xì)胞反應(yīng)位點與AE-2的抗原決定簇不同。檢測發(fā)現(xiàn)AE-1細(xì)胞短肢畸形(鼠痘)病毒陰性。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基DMEM10% FBS1% P/S

推薦傳代比例3×10^5-5×10^5cells/mL

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

注意事項該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,請注意離心收集細(xì)胞懸液;請勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

QQ截圖20210907103850.png

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 PEX16 基因全長ORF克隆

 ASB1 基因全長ORF克隆

 ST6GALNAC6 基因全長ORF克隆

 DHDDS 基因全長ORF克隆

 EID3 基因全長ORF克隆

 MTFR1 基因全長ORF克隆

 PHYHIP 基因全長ORF克隆

 SCAMP2 基因全長ORF克隆

 PLSCR4 基因全長ORF克隆

 HEYL 基因全長ORF克隆

AE-1 (小鼠雜交瘤細(xì)胞(抗AChE))腸道菌增菌肉湯(EE) Enterobacteria Enrichment Broth 250g

5g 芐瞇鹽酸鹽 Benzamidine Hydrochloride 4℃保存

100mL TE Buffer,50X,pH8.0 TE Buffer,50X,pH8.0 常溫保存

100µL 小鼠抗HA標(biāo)簽單抗 Anti HA-Tag Mouse MAb -20℃保存

2 ug PT2-HB PT2-HB 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

100mL RNase-free Sarkosyl溶液,10%  常溫

2 ug pRNAT-U6.1/neo pRNAT-U6.1/neo 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

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