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NCI-H209 H209 (小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)

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更新時(shí)間:2025-02-26 16:57:37瀏覽次數(shù):314

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) GOY-01X0391 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
NCI-H209 [H209] (小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 的相關(guān)*:細(xì)胞AKT蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒 10/50 次
細(xì)胞AKT蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒 10/50 次
AKT蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 5次
AKT蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 5次
AKT蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒 25次
細(xì)胞P38蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒 10/20次

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性: 

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

貨號(hào)

NCI-H209 [H209] (小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0391

商品介紹:

名稱(chēng)    NCI-H209 [H209] (小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)  

別稱(chēng)H209; H-209; NCIH209

種屬人類(lèi)

年齡(性別)55

組織來(lái)源肺;源自轉(zhuǎn)移部位:骨髓

生長(zhǎng)特性懸浮細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)圓形細(xì)胞,聚團(tuán)生長(zhǎng)

背景描述NCI-H209細(xì)胞由Gazdar·A·F及其同事于1979年從一名小細(xì)胞肺癌患者的骨髓轉(zhuǎn)移灶中分離建立,該骨髓標(biāo)本的獲取先于患者的治療。NCI-H209細(xì)胞是一種典型的小細(xì)胞性肺癌細(xì)胞,表達(dá)較高水平的4種生化標(biāo)志:神經(jīng)特異性烯醇、肌酸激酶腦型同工酶、左旋多巴脫羧酶、鈴蟾肽樣免疫活性。c-myc DNA序列沒(méi)有擴(kuò)增;未發(fā)現(xiàn)大的結(jié)構(gòu)DNA的異常;NCI-H209細(xì)胞合成與正常肺相當(dāng)量的p53 mRNA。NCI-H209細(xì)胞以聚集體的形式懸浮生長(zhǎng),只有聚集體中的細(xì)胞是有活力的,但是細(xì)胞活率無(wú)法估計(jì),一般培養(yǎng)基中含有大量的細(xì)胞碎片。

生物安全等級(jí)1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基RPMI-164010% FBS1% P/S

推薦傳代比例5×10^5-1×10^6cells/mL

推薦換液頻率2~3/

倍增時(shí)間~50-70小時(shí)

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

致瘤性Yes, forms transplantable tumors with typical SCLC histology in nude mice.

注意事項(xiàng)該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,請(qǐng)注意離心收集細(xì)胞懸液;請(qǐng)勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

QQ截圖20210907103850.png

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 FBL 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 TMOD1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 SORD 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 FIBP 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 TMOD3 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 CALHM3 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 GPD1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 TBCC 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 GMPR 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 IK 基因全長(zhǎng)ORF克隆

NCI-H209 [H209] (小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 1000 U 限制性?xún)?nèi)切KpnI Restriction Endonuclease -20℃保存

1mL Protease Inhibitors Cocktail for General Use  Protease Inhibitors Cocktail for General Use  常溫保存

1mL 衣溶液,5mg/mL Tunicamycin  Solution 4℃避光保存

2 ug pTagCFP-N pTagCFP-N 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

UVM1添加劑 UVM Supplement1 1ml*5支

1瓶 97-L細(xì)胞株 97-L 低溫運(yùn)輸和保存

1000支 200 μL RNase-free 黃吸頭(袋裝)  常溫

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