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SK-Hep-1 (肝癌細胞)

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更新時間:2025-02-26 19:18:38瀏覽次數(shù):364

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0211 應用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
SK-Hep-1 (肝癌細胞) 的相關(guān)*:線粒體呼吸鏈復合物II(琥珀酸-輔Q還原) 20次
活性定量檢測試劑盒
線粒體呼吸鏈復合物III(輔Q-C還原) 20次
活性定量檢測試劑盒 (10樣本)
線粒體呼吸鏈復合物IV(正鐵細C-氧化還原) 20次
活性定量檢測試劑盒

詳細介紹

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

SK-Hep-1 (肝癌細胞)

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0211

商品介紹:

名稱    SK-Hep-1 (肝癌細胞)    

別稱SK-Hep-1; SK HEP-1; SK HEP 01; SK-Hep1; Sk-Hep1; SK Hep1; SKHEP-1; SKHEP1; SKHep1; SK_HEP1

種屬人類

年齡(性別)男性,52

組織來源腺癌,肝,腹水

生長特性貼壁細胞

細胞形態(tài)上皮細胞樣

背景描述SK-HEP-1細胞已被鑒定為內(nèi)皮來源。SK-HEP-1細胞為異倍體女性人(XX),染色體在亞三倍體范圍內(nèi)。在裸鼠中,SK-HEP-1細胞能形成與肝癌相一致的大細胞癌。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基MEM10% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:2-1:4

推薦換液頻率2~3/

倍增時間~30小時

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

致瘤性Yes, in nude mice; forms large cell carcinoma consistent with hepatoma.

 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

豬肌紅蛋白(MB)免疫試劑盒進口、分裝

蜥蜴25羥基膽固醇(25-OHC)免疫試劑盒*直銷

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SK-Hep-1 (肝癌細胞) 100次 植物種屬鑒定PCR Mix 1(細胞核ITS) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

2 ug pMSCV-neo pMSCV-neo 低溫運輸,-20℃保存

5mL dNTP溶液,100 mM dNTP Solution,100 mM -20℃保存

1瓶 RBL-2H3細胞株 RBL-2H3 低溫運輸和保存

40%膽汁肉湯 40%Bile Broth 100g

5mg 環(huán) A Cyclosporin A 4℃保存

50T 產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

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