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B16-F10 (小鼠皮膚黑色素瘤細胞)

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更新時間:2025-02-26 19:25:29瀏覽次數(shù):518

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0317 應用領域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
B16-F10 (小鼠皮膚黑色素瘤細胞)的相關*:盤基網(wǎng)柄(Dicyostelium)細胞趨化作用(chemotaxis) 10次
軟瓊脂檢測試劑盒
細細胞趨化作用(chemotaxis)軟瓊脂檢測試劑盒 10次
通用型細胞粘附性(cell adhesion)比色法檢測試劑盒 50次
通用型細胞粘附性(cell adhesion)熒光檢測試劑盒 50次
通用型血液凝集分子纖維蛋白

詳細介紹

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

B16-F10 (小鼠皮膚黑色素瘤細胞)

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0317

商品介紹:

名稱    B16-F10 (小鼠皮膚黑色素瘤細胞)   

別稱B16/F10; B16 F10; B16F10; B16 melanoma F10

種屬小鼠

年齡(性別)不詳

組織來源器官:皮膚;品系:C57BL/6J;疾?。汉谏亓?/span>

生長特性貼壁細胞

細胞形態(tài)成纖維細胞樣

背景描述B16-F10細胞是B16-F0細胞的亞系。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基RPMI-164010% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO2,5%

溫度:37℃

注意事項B16系列細胞,使用DMEM培養(yǎng)時可能出現(xiàn)黑色素快速積累,細胞不增殖或死亡的情況,若您需要分泌黑色素相關實驗可更換為DMEM培養(yǎng)。

 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

端粒逆轉錄(TERT)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

植物D(VD)免疫試劑盒進口、組裝

大鼠基質金屬蛋白4(MMP-4)免疫試劑盒進口、分裝

狗微管相關蛋白tau(MAPT)免疫試劑盒進口、分裝

魚氧化(PO)免疫試劑盒進口、分裝

大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)免疫試劑盒進口、組裝

CD31分子(CD31)免疫試劑盒進口、分裝

apelin 12(AP12)免疫試劑盒進口、分裝

小鼠可溶性血栓調節(jié)蛋白(sTM)免疫試劑盒進口、分裝

豬色素上皮衍生因子(PEDF)免疫試劑盒*直銷

B16-F10 (小鼠皮膚黑色素瘤細胞)1盒 無內(nèi)毒素槍頭,1 mL  

24 T 一氧化氮合成測試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

250mL MES Buffer,1.0M,pH6.5   MES Buffer,1.0M,pH6.5   常溫保存

250ug lambda(λ) DNA(不含N6-甲基腺) Lambda DNA(λ DNA) -20℃保存

2 ug pQE-40 pQE-40 低溫運輸,-20℃保存

肝湯 Liver Broth 250g

10g 植酸鈉 Phytic Acid Sodium Salt Hydrate 室溫陰涼保存

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