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NADP磷酸酶(NADPase)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

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  • NADP磷酸酶(NADPase)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

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更新時(shí)間:2025-03-03 19:40:18瀏覽次數(shù):270

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/48樣
貨號(hào) GOY-SH118-B 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 檢測(cè)方法 可見(jiàn)分光光度法
產(chǎn)品類別 輔酶Ⅱ系列 品牌 谷研
貨期 現(xiàn)貨    
NADP磷酸酶(NADPase)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:弓形桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒節(jié)菱孢霉屬通用PCR檢測(cè)試劑盒馬節(jié)桿菌PCR檢測(cè)試劑盒節(jié)桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒蜜蜂球囊菌PCR檢測(cè)試劑盒黃曲霉PCR檢測(cè)試劑盒煙曲霉PCR檢測(cè)試劑盒構(gòu)巢曲霉PCR檢測(cè)試劑盒赭曲霉PCR檢測(cè)試劑盒寄生曲霉PCR檢測(cè)試劑盒曲霉屬通用PCR檢測(cè)試劑盒同豬皰疹病毒Ⅰ型奧葉茲基氏病病毒PCR檢測(cè)試劑盒

詳細(xì)介紹

NADP磷酸酶(NADPase)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

NADP磷酸酶(NADPase)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn),不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用!
商品屬性:
NADP磷酸酶(NADPase)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

貨號(hào)

GOY-SH118-B

檢測(cè)方法

可見(jiàn)分光光度法

規(guī)格

50管/48樣

產(chǎn)品類別

輔酶Ⅱ系列


測(cè)定意義:

NADP磷酸酶(NADPase)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

NADPase主要存在于植物組織中,是生物體內(nèi)催化NADP+降解為NAD+的酶,與NADK一起調(diào)控NAD和NADP之間的平衡。

測(cè)定原理

NADPase能夠催化NADP+水解為NAD+和無(wú)機(jī)磷的反應(yīng),通過(guò)測(cè)定無(wú)機(jī)磷的量來(lái)測(cè)定NADPase活性。

所需的儀器和用品

可見(jiàn)分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水

試劑的組成和配制:

提取液一:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。

提取液二:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:粉劑×1 瓶,-20℃保存;

試劑二:液體 20mL×1 瓶,4℃保存;

試劑三:液體 14uL×1 支,4℃保存;

組織樣本的前處

①總 GAPDH 酶提取:建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時(shí)間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測(cè)定。

②胞漿和葉綠體 GAPDH 酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一),冰浴勻漿后于 4℃,200g 離心 5min,棄沉淀,取上清4℃,8000g 離心 10min,取上清用于測(cè)定胞漿 GAPDH 酶活性,取沉淀加 1mL 提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時(shí)間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取清測(cè)定葉綠體中 GAPDH 酶活性。建議測(cè)定總 GAPDH 酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的GAPDH,則按照步驟②提取粗酶液。細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的前處理先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

NADP磷酸酶(NADPase)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

測(cè)定步驟:
NADP磷酸酶(NADPase)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 340nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 樣本測(cè)定

(1)工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,充分溶解,37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)預(yù)熱 10 分鐘;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

(2)在試劑三中加入 500μL 蒸餾水,充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

(3)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 5μL 樣本、5μL 試劑三和 190μL 工作液,混勻,加入最后一個(gè)試劑的同時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí),記錄 340nm 處 20s 時(shí)的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值 A2,計(jì)算 ΔA=A1-A2。

GAPDH 活性計(jì)算

a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1286×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計(jì)算

單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=1286×ΔA÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

單位的定義:每一萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2.572×ΔA

V 反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.005 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500 萬(wàn)。

b.用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=2572×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計(jì)算

單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2572×ΔA÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

單位的定義:每一萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=5.144×ΔA

V 反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103L / mol /cm;d:96 孔板光徑,0.5cm;V 樣:加入樣本體積,0.005 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500 萬(wàn)。

生化試劑盒的使用注意事項(xiàng):
NADP磷酸酶(NADPase)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

選擇合適的試劑盒:根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜋z測(cè)對(duì)象選擇合適的試劑盒,確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。

嚴(yán)格遵循說(shuō)明書:按照試劑盒的說(shuō)明書進(jìn)行操作,避免誤用或浪費(fèi)。

注意保存條件:按照試劑盒的保存條件進(jìn)行妥善保存,避免陽(yáng)光直射、高溫或潮濕等不利因素。

控制實(shí)驗(yàn)條件:在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件,如溫度、時(shí)間、pH值等,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性。

公司正在出售的產(chǎn)品:
NADP磷酸酶(NADPase)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

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ADP含量測(cè)試盒HPLC法

人肝脂ELISA試劑盒

AMP含量測(cè)試盒HPLC法

人干擾素調(diào)節(jié)因子ELISA試劑盒

訂購(gòu)流程:
NADP磷酸酶(NADPase)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

1、訂購(gòu)前,請(qǐng)與銷售員核對(duì)產(chǎn)品中文名稱/CAS號(hào)/英文名稱等。

2、我司大部分產(chǎn)品都是現(xiàn)貨,產(chǎn)品核實(shí)好下單后即可當(dāng)天發(fā)貨。(庫(kù)存信息以當(dāng)日為準(zhǔn))如有特殊要求請(qǐng)?jiān)诎l(fā)貨前與銷售員聯(lián)系。

3、我司產(chǎn)品支持款到發(fā)貨、快遞代收尾款、網(wǎng)上現(xiàn)拍等付款方式。

4、質(zhì)量保證,嚴(yán)格把關(guān),如有產(chǎn)品異議經(jīng)公司鑒定確認(rèn)后可包換包退,免除客戶后顧之憂。

5、我司提供完善的售后服務(wù),使用過(guò)程中如有任何疑問(wèn),可提供技術(shù)指導(dǎo)。


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