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簡(jiǎn)析人正常組織來源細(xì)胞傳代的幾種技術(shù)方法
閱讀：234 發(fā)布時(shí)間：2017-10-9人正常組織來源細(xì)胞是指從機(jī)體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體培養(yǎng)的細(xì)胞，稱為原代細(xì)胞。
一般認(rèn)為，培養(yǎng)的原代的第1代細(xì)胞和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。在人工條件下使其原代細(xì)胞生存、生長(zhǎng)、繁殖和傳代，進(jìn)行細(xì)胞生命過程、細(xì)胞癌變、細(xì)胞工程等問題的研究。
那么關(guān)于原代細(xì)胞的傳代培養(yǎng)，我們應(yīng)該怎么做呢？
一、貼壁細(xì)胞的消化法傳代
1、吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。
2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或與EDTA混合液）輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)瓶，使瓶底細(xì)胞都浸入溶液中。
3、消化2-5分鐘后把培養(yǎng)瓶放置在顯微鏡下進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)原貼壁的細(xì)胞逐漸趨于圓形，在還未漂起時(shí)，棄去消化液，加入培養(yǎng)液終止消化。
4、用吸管將貼壁的細(xì)胞吹打成懸液，分別接種到另外兩到三個(gè)培養(yǎng)瓶中，置37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。第二天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
二、懸浮細(xì)胞的傳代
1、直接傳代
① 讓懸浮細(xì)胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3。
② 用吸管吹打形成細(xì)胞懸液后，分別接種到另外兩到三個(gè)培養(yǎng)瓶中，置37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2、離心法傳代
① 將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，離心800-1000rpm，5分鐘。
② 去除上清，加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi)，用吸管吹打使之形成細(xì)胞懸液。
③人正常組織來源細(xì)胞將細(xì)胞懸液分別接種到另外兩到三個(gè)培養(yǎng)瓶中，置37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
53-39-4 氧雄龍標(biāo)準(zhǔn)品 Oxandrolone CIII 50mg
53-36-1 甲潑尼龍醋酸酯標(biāo)準(zhǔn)品 Methylprednisolone Acetate 200mg
5333-42-6 辛基十二烷醇標(biāo)準(zhǔn)品 Octyldodecanol 200mg
532-76-3 鹽酸?？丝ㄒ驑?biāo)準(zhǔn)品 Hexylcaine Hydrochloride 1g
532-32-1 苯甲酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Benzoate 1g
532-03-6 美索巴莫標(biāo)準(zhǔn)品 Methocarbamol 200mg
53-19-0 米托擔(dān)標(biāo)準(zhǔn)品 Mitotane 500mg
53-16-7 雌酚酮標(biāo)準(zhǔn)品 Estrone 200mg
530-43-8 氯霉素A多晶型標(biāo)準(zhǔn)品 100mg
530-43-8 無味氯霉素A晶型標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
530-43-8 氯霉素棕櫚酸酯標(biāo)準(zhǔn)品 Chloramphenicol Palmitate 200mg
人正常組織來源細(xì)胞