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鑒定轉(zhuǎn)化細(xì)胞死活的方法

閱讀:235          發(fā)布時間:2017-10-11

用來判斷轉(zhuǎn)化細(xì)胞死活的常用熒光探針有二大類:一類是能透過活的細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)而發(fā)出熒光的物質(zhì),例如FDA可被活細(xì)胞持留而發(fā)出黃綠色熒光,若細(xì)胞有損傷 則會從細(xì)胞中流失,觀察不到熒光。另一類是不能透過活細(xì)胞膜,但能對固定的細(xì)胞及膜有破損的細(xì)胞的核進(jìn)行染色,例如碘化丙啶( PI,Propidium iodide )和溴化乙錠( EB,Ethidium bromide )就是常用的第二類熒光探針。碘化丙啶(PI)不能穿透細(xì)胞膜,對于具有完整細(xì)胞膜的正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞不能染色。而對于壞死細(xì)胞,其細(xì)胞膜的完整性喪 失,碘化丙啶(PI)可以染色壞死細(xì)胞。目前常用的一種細(xì)胞凋亡與壞死檢測試劑盒則含有Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)兩種熒光染料。細(xì)胞發(fā)生凋亡時,染色質(zhì)會固縮,Hoechst 33342可以穿透細(xì)胞膜,染色后凋亡細(xì)胞熒光會比正常細(xì)胞明顯增強(qiáng)。上述兩種染料雙染后,使用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測時,正常細(xì)胞為弱紅色熒光+弱 藍(lán)色熒光,凋亡細(xì)胞為弱紅色熒光+強(qiáng)藍(lán)色熒光,壞死細(xì)胞為強(qiáng)紅色熒光+強(qiáng)藍(lán)色熒光。
德國INNOVATIS出產(chǎn)的全自動Cedex細(xì)胞存活率/細(xì)胞計(jì)數(shù)儀/細(xì)胞分析儀是 世界上*臺高分辨率、高清晰度掃描()細(xì)胞分析儀,具有全自動臺盼藍(lán)染色、顯微CCD成象、CEDEX工作站軟件,可用于制藥、醫(yī)學(xué)、發(fā)酵、免疫、 病理、毒性測試、生物技術(shù)等學(xué)科的研究開發(fā)和工業(yè)過程中的細(xì)胞計(jì)數(shù)和分析。自動分析結(jié)果,轉(zhuǎn)化細(xì)胞檢測分析數(shù)據(jù)輸出(11項(xiàng)):總細(xì)胞數(shù)目,總細(xì)胞濃度 (cells/mL) ;活細(xì)胞數(shù)目,活細(xì)胞濃度 (cells/mL);死細(xì)胞數(shù)目,死細(xì)胞濃度 (cells/mL) ;細(xì)胞存活率 (%) ;細(xì)胞的平均圓度 (compactness) ;細(xì)胞的平均直徑 (um) ;細(xì)胞團(tuán)比例 (Aggregate Rate);細(xì)胞直徑分布圖 (Diameter Histogram);細(xì)胞團(tuán)分布圖 (Aggregate Histogram);細(xì)胞圓度分布圖 (Compactness Histogram) ;細(xì)胞生長時間曲線(C*tion Time Chart)。
青藤堿    20mg    含量測定    110774-200206
胡椒堿    20mg    含量測定    110775-200203
香草酸    50mg    含量測定    110776-200402
柴胡皂苷 a    20mg    含量測定    110777-200507
柴胡皂苷 d    20mg    含量測定    110778-200506
氧化苦參堿    20mg    含量測定    110780-200405
黃芪甲苷    20mg    含量測定    110781-200613
斷血流皂苷 A(醉魚草皂苷 Ⅳb)    20mg    TLC掃描法     含量測定    110782-200301
轉(zhuǎn)化細(xì)胞

 

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