化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
商品介紹：
細胞膜染色試劑盒是用一種親脂性的橙色熒光探針進行細胞膜染色。染色液I 進入細胞膜后，在整個細胞膜上擴散，佳濃度時可以使整個細胞膜染色。染色液I在進入細胞膜之前熒光非常弱，當與細胞膜結(jié)合后其熒光強度大大增強，被激發(fā)后可以發(fā)出橙色的熒光，具有很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。 染色液I 通常不會明顯影響細胞的活力，因此被廣泛用于正向或逆向的，活的或固定的神經(jīng)等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-term tracer)。除了簡單的細胞膜熒光標記外，還可以用于檢測細胞的融合和粘附，檢測發(fā)育或移植過程中細胞遷移，通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細胞膜上的擴散，檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。 儲存條件：4℃避光保存。長期保存-20℃避光保存。 有效期：六個月。 |
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：細胞膜染色試劑盒(橙色熒光)-M03
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：1000T|5000T
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調(diào)控；
⑤細胞分化及其調(diào)控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
連翹酯苷E(標準品)英文名稱： 2-Hydroxy-5-nitronicotinic acidB淋巴生發(fā)中心相關(guān)蛋白抗體包裝25g
蓮心堿（標準品）英文名稱： Hexatriacontane鱗狀癌增強蛋白1抗體包裝5g
蓮心堿高鹽英文名稱： HexatriacontaneGα gust抗體包裝1g
蓮心堿高鹽（標準品）英文名稱： Hexadecane谷?？贵w包裝10g
蓮須（標準品）英文名稱： Hexadecane絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCMa抗體包裝50g
蓮子（標準品）英文名稱： 1-HexanolG蛋白結(jié)合蛋白5抗體包裝1g
蓮子心（標準品）英文名稱： 1-Hexanol腫瘤/抗原家族4亞型7抗體包裝25g
兩面針（標準品）英文名稱： 1-HexadecanolGDNF家族受體α3抗體 GFR α3包裝5g
亮菌(標準品)英文名稱： 1,6-Hexanediol甘受體β/GlyR β抗體包裝100g
遼東楤木皂苷X(標準品)英文名稱： Heptadecane神經(jīng)甘肽樣肽GALP抗體包裝25g
了哥王（標準品）英文名稱： Hentriacontane甘肽受體2抗體包裝5g
烈香杜鵑（標準品）英文名稱： Hexacosane甘肽受體3抗體包裝1g
烈香杜鵑油（標準品）英文名稱： 2,5-Hexanedione腦腸肽受體抗體包裝25g
林生續(xù)斷苷I英文名稱： 2,5-HexanedioneGRC5蛋白抗體包裝5g
林澤蘭內(nèi)酯B（標準品）英文名稱： 3',3'',5',5''-Tetrabromophenolphthaleinethyl ester腸和大腦特定同源蛋白1抗體包裝1g
熱帶假絲酵母Candida│tropicalis 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,可用于培養(yǎng)羥脯試劑盒沒食子兒茶;(-)-Gallocate
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品強啡肽試劑盒木糖;D-Xylose
蛹假交替單胞菌Pseudoalteromonas│undina 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%潛伏轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白2試劑盒3-O-沒食子酰粘;3-O-gallo
細胞膜染色試劑盒(橙色熒光)-M03香菇 二硅化鉻磷酸化過氧化物體增殖物激活受體γ抗體Elisa
假單胞 化鉿防御α2Elisa
膠孢 碲化銀(I)防御α3Elisa
金色毛殼 (S)-(-)-3-氨基奎寧 活化蛋白C抵抗Elisa
Pseudomonas plecoglossicida 2,3,9,10,16,17,23,24-八辛氧基-29H,-31H-酞菁染料多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移7Elisa
Xenorhabdus 對傘花烴鎘金屬硫蛋白Elisa
阿氏芽孢桿 優(yōu)葛縷酮成纖維生長因子6Elisa
大腸桿 雷沙吉蘭無翅型MMTV整合位點家族成員9AElisa
釀酒酵母 氯化(茚基)雙(三苯基膦)釕(II)肌蛋白Fbox-1Elisa
非無藥品 沙門（陽性） Ampiroxicam肌肉特異性泛蛋白連接1Elisa
費氏中華根瘤 甲基叔戊基活化轉(zhuǎn)錄因子6Elisa
枝狀枝孢 甲氧基聚乙二馬來酰前列腺分泌蛋白Elisa
稻平臍蠕孢 β-Calcitonin Gene Related Peptide human流感病A IgM抗體Elisa
青銅色小單孢 4-溴-3-甲囊蟲病Elisa
賴氨酸芽胞桿屬 5(6)-TAMRA [5-(6)-Carboxytetramethylrhodamine]副流感病1,2,3型IgG抗體Elisa
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