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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Hoechst33258 Staining Solution | 10ml|50ml | 1～3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：
用途： 細胞凋亡檢測、普通細胞核染色、常規(guī)的DNA染色。 注意事項： Hoechst33258是一種熒光染料，可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞的毒性較低。染色染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測?？芍苯佑糜诠潭毎蚪M織的細胞核染色，也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色。 儲存條件：-20℃，避光，6個月 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
毛鉤藤堿英文名稱： (E)-2-ButenalG蛋白γ13/Gγ13 抗體包裝1g
毛訶子（標準品）英文名稱： DodecaneG蛋白γ5/Gγ5 抗體包裝1g
毛花苷C英文名稱： Decanoic acidG蛋白γ 1/Gγ 1 抗體包裝250mg
毛蘭（標準品）英文名稱： Dimethyl adipate鳥嘌呤核苷結合蛋白2抗體包裝5g
毛里求斯排草英文名稱： Dibutyl maleate鳥嘌呤核苷結合蛋白3樣蛋白抗體包裝100ml
毛兩面針英文名稱： Dimethyl sulfoxide溶體累積病相關蛋白/口吃相關蛋白抗體包裝500ml
毛蕊異黃（標準品）英文名稱： n-Decyl alcohol溶體累積病相關蛋白/口吃相關蛋白抗體包裝100g
毛蕊異黃苷（標準品）英文名稱： Diethyl succinate促性腺激釋放激2抗體包裝25g
茅膏菜（標準品）英文名稱： Diethyl sebacate基葡萄糖6-硫酯抗體包裝500g
沒食子兒茶（標準品）英文名稱： Docosane高爾基體膜相關蛋白抗體包裝1g
沒食子兒茶沒食子酯（標準品）英文名稱： Dotriacontane高爾基體膜相關蛋白5抗體包裝25g
沒食子(標準品)英文名稱： 1-Heptanol高爾基體膜相關蛋白7抗體包裝5g
沒食子酯（標準品）英文名稱： 4-Hydroxybutanoic acid lactone高爾基復合體CFR1抗體包裝100g
沒食子一物(標準品)英文名稱： γ-Heptalactone高爾基體蛋白97抗體包裝25g
沒食子酰芍藥苷英文名稱： (+)-Fenchone高爾基體蛋白A亞基4抗體包裝100mg
細極鏈格孢Alternaria│tenuissima (Kunze) Wiltshire 質量規(guī)格：>98%葡萄糖6磷脫氫試劑盒蔓荊子黃;Casticin
地中海中慢生根瘤菌Mesorhizobium│mediterraneum 質量規(guī)格：>95%,高效的選擇性亞型2鈉-葡萄糖轉運蛋白(SGLT2) 抑制劑葡萄糖-6-磷/葡萄糖-6-磷酯試劑盒絡塞定;Rosiridin
蠕蟲節(jié)叢孢Arthrobotrys│vermicola 質量規(guī)格：AR,分析純破傷風試劑盒絡緦;Rosin
Hoechst33258染色液新疆鹽地桿 10-溴-1-癸烯Ras相關C3肉底物1Elisa
釀酒酵母 2-氯-3-氟-4-(三氟甲基)吡啶肽-主要組織相容性復合體復合物Elisa
硫磺 (R)-(+)-1,2,3,4-四氫-3-異喹啉甲跨膜絲氨酸蛋白143Elisa
傳染性支氣管炎病 [二]乙酸亞甲酯血管內皮鈣黏蛋白5Elisa
黃褐環(huán)銹傘 反-戊烯二酸膠原凝集11Elisa
約氏黃桿 1-(2-氨基乙基)-2-咪唑啉酮促消退介質Elisa
榛色假單胞 4,4-二甲氧基-3-羰基戊酸甲酯磷酸糖異構1Elisa
大腸埃希氏桿 3-羥基-2-吡啶甲酸甲酯類白抗體Elisa
埃里希青霉 3-[4-(芐氧基)苯基]烯酸酚Elisa
Chitinophaga sancti 1-芐基-4-基24-羥基膽固Elisa
雙孢蘑菇 4-羥基吡咯烷-2-2-溴-5-甲氧基-1,3-二甲苯尿苷二磷酸葡萄糖Elisa
節(jié)桿屬 4-羥基吡咯烷-2-酮鳥苷二磷酸葡萄糖Elisa
秦氏蜜環(huán) 4-(4-羥基苯基)5-羥色受體1B抗體Elisa
賈巴爾普爾毛殼 苯硫胃泌17抗體Elisa
哈茨木霉 9-(4-溴苯基)-10-苯基蒽含半胱氨酸豐富分泌蛋白LCCL域蛋白2Elisa
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