Hoechst33258染色液(1mg/ml)公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-MAP2 (Thr1620/1623) 化微管相關(guān)蛋白2抗體4-溴-4',4''-二三苯 95%
MAP1A 微管相關(guān)蛋白1A抗體聯(lián)芐 99%
Talin 踝蛋白抗體2-叔丁蒽醌 98%
Phospho-Talin (Ser425) 化踝蛋白抗體4,4'-聯(lián)苯二 97%
TBX2/T-box2 新型抑癌因抗

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
沒藥（膠質(zhì)沒藥）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Indole高爾基體外周膜蛋白1抗體包裝50mg

沒藥（天然沒藥）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ethyl octanoate高爾基體膜蛋白抗體包裝100mg

玫瑰花（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2-Ethyl-1-hexanol高爾基體磷蛋白6抗體包裝100mg

玫瑰花總黃英文名稱： Ethyl palmitate高爾基SNAP受體復(fù)合物1抗體包裝25g

蒙花苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 2-Ethylhexanoic acid谷草酰乙轉(zhuǎn)1樣蛋白1抗體包裝5g

迷迭香（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： p-AnisaldehydeG蛋白偶聯(lián)受體52抗體包裝1g

密蒙花（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Bis(2-ethylhexyl)adipate核膜糖蛋白210抗體包裝5g

蜜環(huán)菌粉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Disperse Blue 35GADD153抗體包裝1g

綿萆薢（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 9-MethylanthraceneG蛋白偶聯(lián)受體57抗體包裝10MG

綿大戟（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： MCPAGSK-3結(jié)合蛋白FRAT2抗體包裝1g

綿馬貫眾（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Methyl oleate磷化內(nèi)收蛋白gamma抗體包裝250mg

綿馬貫眾ABBA（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Isoeugenol生長因子受體結(jié)合適應(yīng)蛋白抗體包裝100g

綿馬ABA（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： NonaneGARNL3蛋白抗體包裝25g

棉花根（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1-NaphtholTuberin樣蛋白1抗體包裝5g

棉子糖（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： N-NitrosodiethylamineX連鎖Charcot-Marie-Tooth變相關(guān)蛋白抗體包裝1g

炭疽芽孢桿菌Bacillus│anthracis 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR蘋果脫氫1試劑盒絡(luò)塞琳;Rosarin

北方梭囊孔菌Climacocystis│borealis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品平滑肌肌動(dòng)蛋白試劑盒毛兩面針;toddalolactone

球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR嘌呤核苷磷化試劑盒磷川芎;Tetramethylpyr
Hoechst33258染色液(1mg/ml)炭黑曲霉 乙酸氯甲酯狀瘤病抗體18型Elisa

海洋桿 N-羥甲基乙酰蓖麻Elisa

大腸埃希氏 1-BOC-3-甲酰肼硬皮病Elisa

瑟氏泰勒蟲(成縣株） 4-溴-2-氟苯乙酮硬皮病Elisa

秦氏蜜環(huán) 6-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體Elisa

布氏艾美耳球蟲 2,4-二羥基-3-甲載脂蛋白DElisa

黃傘 2-乙Osterix蛋白Elisa

尖孢鐮刀 羥乙酸異酯核轉(zhuǎn)錄因子Elisa

黑曲霉 甲基2,5-二氯異煙酸酯神經(jīng)膠質(zhì)成熟因子βElisa

蠟樣芽孢桿 酸乙酯色氨酸羥化2Elisa

冬蟲夏草 L-谷氨酸-5-叔丁酯-1-甲酯鹽酸鹽彈性蛋白1Elisa

灰色困難鏈霉 1-己基吡啶三氟甲磺酸鹽乙脫氫Elisa

弗雷德里克斯堡假單胞 2,6-二甲氧基吡啶牙本質(zhì)涎磷蛋白Elisa

黑化鏈霉 環(huán)酰鱗狀癌相關(guān)抗原Elisa

釀酒酵母 2-正辛基-1-十二磷酸甘油酸脫氫Elisa