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EB染色液

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更新時間:2022-04-21 15:28:30瀏覽次數(shù):352

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100T
貨號 GOY-01X9832 應用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
EB染色液公司*的產(chǎn)品:Phospho-PPIG (Ser376) 化親環(huán)蛋白(親環(huán))PPIG抗體芐酯 96%
PKB/Akt1 蛋白激B4-異酯 98%
phospho-AKT/PKB (Ser473) 化蛋白激B抗體環(huán)己異酯 98%
phospho-Akt(Thr308) 化蛋白激B抗體綠麥隆 分析標準品
phospho-Akt (Thr450) 化蛋白激B抗體綠麥隆標準溶液

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

中文名稱:EB染色液

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:100T

發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹:

EB染色液可用于細胞凋亡檢測,也可用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色,染色后可用熒光顯微鏡檢測或流式細胞儀檢測。EB不能穿過活細胞的細胞膜,然而可以通過死細胞破損的細胞膜而對細胞核DNA染色。EB含有一個可以嵌入的堆積堿基之間的一個平面基團,這個基團的固定位置及其與堿基的密切接近,導致染料與DNA結(jié)合并呈現(xiàn)熒光。

儲存條件:4℃避光保存。

有效期:一年。

細胞生物學研究有以下幾個方面:

細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細胞核、染色體以及基因表達的研究;

②生物膜與細胞器的研究;

③細胞骨架體系的研究;

④細胞增殖及其調(diào)控;

⑤細胞分化及其調(diào)控;

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細胞的起源與進化;

⑧細胞工程.

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

地膚子皂苷Ic(標準品)英文名稱: Copper(II) oxalate hydrate卷曲蛋白FZD7抗體包裝25g

(標準品)英文名稱: Copper(II) sulfate, anhydrous口蹄疫病A型抗體包裝500g

地骨皮(標準品)英文名稱: Creatinine磷化粘著斑激抗體包裝1g

地瓜藤(標準品)英文名稱: Crocein scarlet 7B人纖維蛋白原抗體包裝5g

地黃(生地黃)(標準品)英文名稱: Crystal ponceau 6R鋅指蛋白798抗體包裝25g

地錦草(斑地錦)(標準品)英文名稱: Cyclocytidine肽基脯酰順反異構(gòu)FKBP10抗體包裝5g

地錦草(標準品)英文名稱: Cytidine-5'-triphosphate (CTP), 3sodium肽基脯酰順反異構(gòu)FKBP11抗體包裝250g

地龍(參環(huán)毛蚓)(標準品)英文名稱: Cytochalasin AFKBP135蛋白抗體包裝50g

地稔(標準品)英文名稱: Cytochalasin C肽基脯異構(gòu)FKBP25抗體包裝1g

地蜈蚣(標準品)英文名稱: Cytochalasin D肽基脯異構(gòu)FKBP8抗體包裝250mg

地榆(地榆)(標準品)英文名稱: Cytochalasin E磷化叉頭蛋白L2抗體包裝100g

地榆皂苷II(標準品)英文名稱: D-(+)-Camphoric acid叉頭蛋白N2抗體包裝25g

地榆皂苷I(標準品)英文名稱: D-(+)DBTA, Dibenzoyl-D-tartaric acid, monohydrate磷化叉頭蛋白家族1抗體包裝50MG

滇藏五味子G英文名稱: DATD, (+)-N,N'-Diallyltartramide磷化叉頭蛋白家族1抗體包裝1g

滇桂艾納香(標準品)英文名稱: DDSA, dodecenylsuccinic anhydrous旋轉(zhuǎn)異構(gòu)FKBP6抗體包裝250mg

巴氏醋桿菌Acetobacter│pasteurianus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR神經(jīng)母瘤抗體試劑盒千金子甾;Euphobiasteroi

球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定神經(jīng)節(jié)苷脂試劑盒氫化原阿片堿;Hydroprotopin

鮑氏志賀菌Shigella│boydii 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR神經(jīng)節(jié)苷脂試劑盒7-羥基-5,8-二氧基黃烷;7-H
EB染色液大腸埃希氏 度骨化化高鐵血紅蛋白Elisa

黑曲霉 Tofacitinib (CP-690550) Citrate瓜氨酸化組蛋白H3Elisa

谷氨酸棒桿 CP-724714轉(zhuǎn)錄因子活化蛋白2CElisa

*百脈根根瘤 Raltegravir (MK-0518)Janus激3Elisa

托湖萊茵海默氏 Apixaban溶質(zhì)載體家族3成員2Elisa

黑曲霉 PNU-120596熱休克蛋白90βElisa

側(cè)孢短芽孢桿 Cyclophosphamide酸Elisa

長枝木霉 Scopine腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6Elisa

棱柱散尾 EX 527 (Selisistat)骨架關(guān)聯(lián)蛋白4Elisa

枯草芽胞桿 EltrombopagB因子Elisa

糞腸球 NifuraH因子Elisa

不動桿屬 Purmorphamine間粘附分子2Elisa

枯草芽孢桿 EdoxabanCereblon蛋白Elisa

巨大芽胞桿 Salmon Calcitonin Acetate絲氨酸;蘇氨酸蛋白激4Elisa

根瘤 R-1479肌動蛋白結(jié)合蛋白Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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